淋巴细胞培养与分离.pptVIP

（4）磁珠分离术 磁珠分离术是将磁性材料颗粒表面进行外理，微球的核心为小金属颗粒，核心处包裹高分子材料（聚苯乙烯），可结合不同的生物大分子物质（抗原、抗体、核酸等），若微球表面包被有免疫物质则称为免疫磁珠，其兼有免疫配基的性质和磁响应性质，即在磁场中显示磁性，移出磁场时磁性消除。 目前商品出售的磁珠有直径为1～5um等不同的规格，表面活性基团有氨基（－NH2）、羧基（－COOH）和羟基（－OH）等。包被的免疫物质有：一抗、二抗等。 方法： 将包被有关抗体的磁珠与待分离细胞充分作用，这样借助于抗体磁珠，将与相应的细胞结合成：细胞－抗体－磁珠复合物，该细胞在磁场中运动与其他细胞产生明显差别。 如采用层析的方法，将层析柱放于强磁场中，与磁珠结合的细胞运动将受限，而未与磁珠结合的细胞将先被洗脱下出来。 再将该柱移出磁场，与磁珠结合的细胞也将被洗脱下来，达到分离目的。 单克隆抗体CD3 羊抗鼠修饰磁球 Biomag 抗CD3磁球 磁球结合T细胞 加入B和T细胞中 负向选择 正向选择 磁架进行分离 直接法对细胞进行分类 间接法对T细胞进行分离 免疫磁珠法细胞分选过程 免 疫 磁 珠 细 胞 分 选 装 置 （5）亲和板结合分离法 原理：各种淋巴细胞亚群具有不同的抗性。 ① 分离CD4+或CD8+细胞，可用抗CD4或CD8单克隆抗体吸附。 ②分离B细胞用