罗汉果的研究.docVIP

药食两用的天然产物之罗汉果的应用研究 西安科技大学 化学与化工学院 应用化学专业 刘彦云 0915020107 ［摘要］ 本文综述了国内外学者近年来对中国特有药食同源植物罗汉果化学成分及生理活性的研究，以及罗汉果生理活性物质的提取分离方法、化学结构、及结构的鉴定，为进一步深入地研究和开发应用罗汉果及其功能性罗汉果苷类成分提供数据资料 [关键词] 罗汉果; 取分离; 结构鉴定；生理活性 1. 罗汉果的简介 罗汉果又名拉汗果、假苦瓜、罗晃子或光果木鳖等， 是一年种多年收的葫芦科植物罗汉果的果实。罗汉果具 有三个比较突出的特点。一是甜度高，热量低_5 J，是 糖尿病患者良好的甜味剂；二是具有较强的保健功能，现代药理研究表明，罗汉果具有提高免疫功能 J、保护肝脏及抑菌作用 J、降血糖[7]、抗氧化_8 等作用；三是毒性低，安全系数高，其水提物的LD 。大于10g／kg。因此，罗汉果作为一种理想的天然功能性甜味剂，具有广阔的市场发展空间 2 罗汉果的主要化学成分 2.1 葫芦素烷三萜类化合物 葫芦素烷三萜类皂苷是罗汉果的主要有效成分之一，约占干果的3％ ]，这类化合物具有共同的苷元Mogrol(罗汉果醇)，大部分具有甜味，但它不属于糖类物质，因此是糖尿病等忌食糖类病患者的理想甜味物质。罗汉果皂苷具有无毒、甜度高、热量低、色泽好、热稳定性好、水溶性好的特点。此外，它属非发酵物质，不易霉变，可以应用于饮料、医药、食品等。 图1汉果醇结构图 罗汉果甜甙Ⅵ，罗汉果甜甙Ⅴ组成，结构如下 图一 果甜甙Ⅵ，罗汉果甜甙Ⅴ 2.2 蛋白质、氨基酸 罗汉果干果中含蛋白质7．1％～7．8％。在其水解物中，除色氨酸未被测定外，18种氨基酸齐全。在测定的氨基酸中，含量最高的有谷氨酸(108．2～ 113．3mg／kg)、天门冬氨酸(93．9～ 112．5mg／kg)、缬氨酸(52．5～55．5mg／kg)、丙氨酸(49．9～66．8mg／kg)、亮氨酸 (48．5～56．7mg／kg)¨ 。谷氨酸是人体中需要量最大的非必需氨基酸，是合成谷胱甘肽的重要原料，可见，罗汉果具有较高的营养价值。 2．3其它成分 罗汉果中还含有甘露醇、维生素、黄酮苷类、多糖及其它微量元素 。 3 罗汉果有效成分的提取分离与提纯 3.1 大孔树脂吸附：干罗汉果粉碎、水溶、提取,至水溶液无甜味为止。水溶液压滤,滤出液经除杂、脱脂处理,得到含罗汉果甙Ⅴ的澄清水溶液。溶液经氧化铝柱脱色,流出液经吸附树脂吸附后,洗脱,洗脱液再经强碱树脂脱色,最后浓缩洗脱液,除去不溶物,结晶,得到高甜度、无臭白色结晶粉末产品。产品经红外光谱测定鉴定为罗汉果甙Ⅴ。 另一工艺为取罗汉果水浸膏若干,水溶,过大孔吸附树脂,得淡黄色总甙,以硅胶柱层析以不同比例的氯仿、甲醇、水混合液洗脱,再经氧化铝柱层析,分别得到罗汉果甙Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ。 3.2 AB - 8 吸附树脂吸附。 　干果粉碎,水溶,除去不溶物,过滤,取滤液经AB - 8 吸附树脂吸附,用水洗吸附柱,再用50 %的乙醇水溶液洗脱,洗脱液浓缩干燥。后用甲醇溶解,过氧化铝柱,用50 %甲醇水溶液洗脱,洗脱液浓缩后溶于正丁醇- 冰乙酸- 水(4∶1∶1) 混合溶剂,溶解干燥物用硅胶层析柱分离,得到罗汉果甜甙[9 ] 。 3.3　Amberlite XAD - 2 树脂吸附。 　　罗汉果水提取物通过Amberlite XAD - 2 树脂[10 ] ,吸附甜味素的树脂用50 %ETOH 洗脱,洗脱物经过Sephadex G- 24 及Amberlite XAD - 2 处理后,以制备薄层层析纯化得Rf0. 67 部分,它的甜度为蔗糖的150 倍。在开水中煮五小时不被破坏。该物质通过H - NMR 谱鉴定为三萜罗汉果甙。 3.4　硅胶柱层析。 　　罗汉果干果甲醇提取物,以已烷脱脂后经过Diaion HP - 20 层析50 %和80 %甲醇洗脱部分分别经硅胶柱层析,三氯甲烷- 甲醇- 水(6∶4∶1) 洗脱得罗汉果甜甙。 3.5　活性碳及硅藻土柱吸附。 　　干果以石油醚脱脂后,甲醇提取物过活性碳和4.罗汉果皂苷V的高效液相制备条件为：制备柱：Shim—PackPREP—ODS (0．25m×20．0 )柱，流动相：20．5％ 乙腈，流速： 8．0mL／min[J9]。硅藻土柱,用20 %ETOH 和吡啶洗脱,前二者分别得罗汉果醇和11 - 氧化罗汉果醇,后者洗脱物经氧化铝柱,以100 %及50 %甲醇洗脱后在经硅胶柱层析得到罗汉果Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ。 3.6 黄酮类化合物常采用溶剂提取法和碱提酸析法进行提取 　罗汉果水浸膏水溶后过大孔树脂, 以90 %ETOH解吸所得物经硅胶柱层析,以三氯甲烷- 甲醇- 水(7∶3∶1) 洗脱,200ml 为一份,