南方红豆杉水提物抑制裸鼠A549肺癌移植瘤生长和其机制探究.docxVIP

南方红豆杉水提物抑制裸鼠A549肺癌移植瘤生长和其机制探究 ［摘要］目的：研究南方红豆杉水提物对裸鼠A549 肺癌移植瘤生长的抑制作用和机制。方法：建立荷A549肺 癌移植瘤模型，随机分为对照组、低、中、高剂量南方红豆 杉水提物实验组，24h后以等体积生理盐水及药物灌胃，给 药7周，每3d测移植瘤长短径，绘制移植瘤生长曲线，给 药7周后处死裸鼠，取瘤组织，计算抑瘤率，采用Real-time PCR及Western blot方法检测mRNA和蛋白水平。结果：南 方红豆杉水提物各剂量组均有明显抑瘤效果（P 2.4 Real-time PCR检测mRNA水平 取50?100 mg移植瘤组织， Trizol法提取总RNA, Nanodrop 2000分光光度计测定RNA 浓度，确定RNA的纯度及浓度，A260/A280在1. 8?2. 0。按 试剂盒说明进行PCR逆转录后，荧光定量PCR仪进行扩增。 以管家基因GAPDH为内参基因，设计引物如下：Survivin上 游引物 5’ -CTACCGAGAACGAGCCTGATT-37 ,下游引物 5’ -AGCCTTCCAATTCCTTAAAGCAG-37 ,扩增产物长度 60 bp； VEGF 上游引物 5’ -TTTGGCAAATACAACCCTTCAGA-3z，下游引 物 5’ -GCAGAAGATACTGTCACCACC-37，扩增