组织分离培养母种、母种的转管.ppt

组织分离培养母种 德化鹏祥中学 组织分离培养母种 组织分离培养母种 母种的来源包括从有关部门引种，以及采用组织分离和孢子分离等方法。 用于组织分离的种菇，要选择头潮菇，外观好、大小适中、菌肉肥厚、尚未弹射孢子、无病虫害的菇体。 组织分离实验 一、实验用具：酒精灯1盏、火柴1盒、解剖刀1把、75%酒精1瓶、接种铲1把、酒精棉球10粒、培养皿2个。 组织分离实验 二、实验材料：种菇2朵、试管斜面培养基4支。 组织分离实验 三、方法步骤： 1、清除种菇表面及菇脚的杂物，再用75%酒精消毒种菇表面、双手及接种工具。 组织分离实验 2、点燃酒精灯，用手把种菇沿柄纵向掰开，使子实体成对等的两半（也可用解剖刀切开），用经灼烧灭菌冷却后的接种铲在菌柄与菌盖交界处挑取大小约为10mm3的组织块，迅速转接到试管斜面培养基上，然后用酒精灯火焰对试管口和棉塞进行灭菌处理，再塞上棉塞。 组织分离实验 3、将接种好的试管置于26~28℃的温度下培养，7~10天菌丝即可长满试管。培养过程中，每天检查，发现污染应及时拣出，选择菌丝生长旺盛的试管用来转管。 母种的转管 引进或分离获得的母种数量有限，往往不能满足生产的需要，因此要对初次获得的母种进行扩大繁殖，以增加母种数量。 将试管菌种接到新的试管斜面培养基上扩大繁殖，称为转管。 母种的转管 一、实验用具：酒精灯1个、火柴1盒、接种钩1把、接种铲1把、镊子1把、酒精棉球10粒（装在广口瓶中）。 组织分离实验 二、实验材料：母种试管1支、试管斜面培养基4支。 母种的转管 三、方法步骤： 1、接种前，先将接种工具和培养基放入接种箱，用紫外灯消毒30分钟（用紫外灯消毒时，人应离开接种室，并在关灯30分钟后方可进入接种室）。洗净双手，擦干，用75%酒精棉球擦拭；接着点燃酒精灯，右手拿起接种铲或接种钩，用火焰灼烧灭菌，待其冷却。 母种的转管 2、左手并握母种试管和斜面培养基试管；右手拿接种铲或接种钩，用右手小指、无名指和手掌拔掉棉塞，夹在其间，迅速用火焰封口。然后右手将接种铲或接种钩通过火焰伸入母种试管，在斜面培养基菌体上挑取少量菌种（稍带培养基），迅速接入试管斜面培养基的中央，并轻轻地按压，以防滑动。棉塞经火焰消毒后塞进试管口。 母种的转管 3、将接种后的母种试管，贴上标签，在试管棉塞外包裹报纸或牛皮纸，捆扎在一起，放在26~28℃的恒温培养箱中培养。待菌丝长满试管后（一般7~15天），可用来制作原种。 母种的转管 4、注意事项：严格按照无菌操作常规进行。 德化鹏祥中学 母种的转管 弹射孢子的菇 用于组织分离的种菇