动作电位1动作电位产生的离子机制2离子电流的分离方法3.ppt

第三章 动作电位 1.动作电位产生的离子机制 2.离子电流的分离方法 3.离子电导和Hodgkin-Huxley模型 3.1 动作电位产生的离子机制 * 概 念 * 电紧张电位：当用直流电刺激神经时, 在阴极和阳 极处膜电位变化。 超极化：阳极膜电位升高。 去极化：阴极膜电位降低。 局部电位：若刺激电流增强, 只在阴极处产生一个 可衰减的电位变化。 动作电位：如果刺激电流增强达到阈值时, 在阴极 产生一个不衰减的“全或无”式的沿神经纤维传导 的神经冲动时。 3.1 动作电位产生的离子机制 一.离子学说及其实验证据 Bernstein的膜学说认为动作电位应等于静息电位 的绝对值。后发现它不能解释动作电位的超射现象。用 毛细管微电极测量枪乌贼大神经纤维兴奋时电位变化发 现动作电位大于膜静息电位。当改变细胞外Na+浓度时动 作电位的时程和大小均发生变化（如图）： ①Na+ 浓度稍减,动作电位上升缓慢，超射减少传导速度变 慢(图A曲线2)； ②减少50%，超射几乎减少一半，上升相更慢(图B曲线2)； ③减少33%，超射几乎完全消失(图A曲线3)。 3.1 动作电位产生的离子机制 1950-1952年Hodgkin，Huxley和Katz提出著名的钠学说， 即离子学说。认为膜静息时：PK＞PNa，PK＞PCl； 膜兴奋时： PNa＞PK，PNa＞PCl，此时 RT [Na+]o ENa=——ln——— =+53mV 与实验测得的+55mV超射相近 F [Na+]i 钠学说得到各方面实验证实。每次动作电位期间Na+内流量与K+外 流量大致相等，关键是两种离子在动作电位期间流动的时相不同。 3.1 动作电位产生的离子机制 1. 静息时细胞膜内外存在各种离子的浓度差,而膜对这些 离子的通透性不同,所以维持-70mV的静息电位； 2. 膜受到电刺激时产生去极化,膜对Na+、K+通透性发生变 化。首先Na+通透性增大，加速膜去极化，发生超射，构成动作 电位上升相； 3. 接着Na+通道失活,而K+通道活化，K+外流，构成动作电位 的下降相。由于钾电导的变化没有失活现象，只是在膜电位的 恢复过程中逐渐降低，延时较长，产生正后电位； 4. 依靠膜上纳泵完成排Na+摄K+，维持膜内外离子浓度差， 恢复静息水平。 3.2 离子电流的分离方法 1. 电压钳原理 2. 分离方法 3.2.1 电压钳原理 在测量快速兴奋过程中离子电流的变化和分离单个离子电流时，常采用电压钳技术。 根据简化电缆模型：一小片膜的等效电路（3－2）,因为Im=∑Iion +IC 令IC=0 得Im=∑Iion此即电压钳技术的原理。 固定膜电位不变，膜电容电流为零，则总电流等于离子电流(3－3)。 3.2.1 电压钳原理 在枪乌贼大纤维内纵向插入两根细铂丝，一根记录电压E，另一根记录电流I。记录膜电位E与调定电压差值经放大进入快速电压-电流转换器(FBA), 加入反馈电流I, 直至膜电位与调定电压相等为止, 维持膜电压不变。 当一个神经冲动到达时，出现膜离子电流，为了维持膜电位不变，就必须输入一个与膜离子电流大小相等，方向相反的补偿电流,记录下这个补偿电流就是膜电流的镜像。 *1.离子置换法* 如图：膜去极化56mV，A为正常海水中记录总离子电流，B为用氯化胆碱溶液代替NaCl后IK，C为A减B后得到的INa，这里就是利用了离子独立的原则。 *2.逆向电位法* 在电压钳实验中不断改变Vm ， Na+的变化：当 Vm ENa，内向INa；Vm=ENa，INa=0；VmENa，外向INa。 右图为Hodgkin等1952年的实验结果。另外，也可直接将膜电位调到某一离子的平衡电位， 这样可消除该离子的影响，测得一电流，用总电流减去测得电流，即该离子电流。 ①阻断钠通道活化的药物 石房蚶(蛤)毒素(STX): 来源于旋沟藻,专一性阻断钠通道,能阻断对TTX不敏感的钠通道。 河豚毒素(TTX): 专一性地阻断钠通道，作用可逆。（见图：TTX对枪乌贼轴突离子电流的影响） ②阻遏钠通道失活化的药物 海葵毒素：其作用是使动作电位下降相延长，形成平台。它不影响钠、钾通道的开放，只是使已开放的钠通道不能立即关闭，继续开放，Na+大