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1. 生物技术的定义和特点 生物技术的定义 利用生物有机体(从微生物直到高等动植物)或其组成部分(包括器官、组织、细胞或细胞器等)发展新产品或新工艺的一种操作技术体系 应用自然科学及工程学的原理,依靠生物作用剂的作用将物料进行加工以提供产品或为社会服务 ——国际经济合作发展组织(1982) 1. 生物技术的定义和特点 生物技术的特点 物料—可再生资源(碳水化合物、蛋白质等):价廉物美 生物作用剂—生物催化剂(酶、细胞):专一性强、转化率高、条件温和、机理复杂 产品或服务—涉及多领域 知识与技术—交叉多学科 1. 生物技术的定义和特点 1. 生物技术的定义和特点 “生物工程”(生化工程)是运用化学工程的原理和方法对实验室所取得的生物技术成果加以开发,使之成为生物反应过程的一门学科。简单地说:是为生物技术服务的化学工程。 “生物工程”研究生物反应过程中有普遍性意义的特殊工程技术问题,如大规模细胞培养过程、大规模培养基和空气的灭菌过程、细胞生长和产物形成动力学、生物反应器的优化操作和设计、生物反应过程的参数检测和计算机应用、生化产品的分离纯化等过程中的工程技术问题。 由于“生物工程”是化学工程的一个分支学科或被认为是生物学和化学工程相结合的交叉学科而又被称为“生物化工”。 2. 生物反应过程的意义和特点 “生物反应过程”实质上是利用生物催化剂以 从事生物技术产品的生产过程。 当过程采用游离的整体微生物活细胞为生物催化剂时,一般称此为发酵过程(也称微生物培养过程、微生物转化过程等)。 当生物催化剂为游离或固定化酶时,此过程则称为酶反应过程。 另外,还有动、植物细胞(组织)培养过程。 2. 生物反应过程的意义和特点 2. 生物反应过程的意义和特点 生物反应过程具有下列特点: 由于采用生物催化剂,反应过程在常温常压下进行,且可运用DNA重组技术及原生质体融合等现代生物技术组建或改造生物催化剂而赋予生物反应过程以现实和潜在的活力,但生物催化剂易于失活,易受环境的影响和杂菌的污染,一般不能长时间使用。 以采用可再生资源(renewable resources —碳水化合物、蛋白质等)为主要原材料,来源丰富、价格低廉,过程中废物的危害性较小,但原料成分往往难以控制,给产品质量带来一定影响。 2. 生物反应过程的意义和特点 与化工生产相比,生产设备较为简单,能量消耗一般也较少,但由于过高的底物或产物浓度常导致酶的抑制或细胞不能耐受如此高的渗透压而失活,因此反应液中的底物(基质)浓度不能过高,因此导致很大的反应器体积且要求在无杂菌污染情况下进行操作。 酶反应过程的专一性强,转化率高,但成本较高,发酵过程成本低,应用广,但反应机理复杂,较难控制,反应液中杂质较多,给提取纯化带来团难。 4. 生物反应过程的生物学与工程学基础 4. 生物反应过程的生物学与工程学基础 种子扩大培养 将保存在砂土管、冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后,再经扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养而获得一定数量和质量的纯种。 种子扩培的目的 获得一定数量和质量的纯种 缩短发酵时间、提高设备利用率、保证生产水平 种子的要求 总量及浓度能满足要求 生理状况稳定 活力强,移种至发酵后,能够迅速生长 无杂菌污染 孢子悬浮液:微孔接种法 摇瓶菌丝体:火焰保护接种或压差法 种子罐之间或发酵罐之间:压差法 种子罐级数: 是指制备种子需逐级扩大培养的次数。 发酵级数确定的依据 级数受发酵规模、菌体生长特性、接种量的影响 级数大,难控制、易染菌、易变异,管理困难,一般2-4级。 在发酵产品的放大中,反应级数的确定是非常重要的一个方面 一级种子罐扩大培养(二级发酵): 茄子瓶斜面或摇瓶种子经过一次种子罐扩大培养,接入发酵罐作为种子,这称为一级种子罐扩大培养。 二级种子罐扩大培养(三级发酵): 茄子瓶斜面或摇瓶种子经过两次种子罐扩大培养,接入发酵罐作为种子,这称为二级种子罐扩大培养。 三级种子罐扩大培养(四级发酵): 一级发酵:孢子或菌丝体直接接入罐中发酵,称一级发酵。 接种龄: 指种子罐中培养的菌体,移入下一级种子罐或发酵罐之前 在原种子罐中的培养时间。 通常接种龄以菌体处于生命力极为旺盛的对 数生长期,且培养液中菌体量还未达到最高 峰时为好。 种子过于年轻会出现: (1)前期生长缓慢(2)整个发酵周期延长 (3)产物开始形成时间晚。 种子过于衰老:引起菌丝过早自溶,生产能力下降。 接种量:是指移入的种子液体积(V1)和接种后培养液体积(V1+V2)的比例(V1/ V1+V2)。 一般接种量:5%~15%过大过小都不好,最终以实践定,如大多数抗生素为7-15%。但是一般认为大一点好。 接种量较大: 接种量过
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