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微生物检测培养基 微生物检测培养基 微生物检测培养基 临床微生物培养基手册大全临床微生物检验 常用根底培养基 ★营养琼脂 【用途】供作一般细菌培养和菌株的纯化及传种用 【原理】培养基含有氮源、碳源和微量无机盐适合一般细菌的生长繁殖 【成分】蛋白胨１０牛肉膏５ .０氯化钠５ .０琼脂粉２０蒸馏水１Ｌ pＨ７ .2～ 【制备】将上述成分 (除琼脂外 )溶于水中校正 pH 后假设琼脂 ,煮沸溶解 ,根据用途不同进行分装 ,经 121℃灭菌 15min,倾注平板或制成斜面 ,置冰箱保存 ,两周内保持用完 【接种】根据用途不同按常规操作 ,35℃ 18～24h 观察结果 【观察结果】在平板上除可以观察菌落的形态外，还可以判断溶血的情况：菌落周围的培养基内红细胞完全破坏为 ? 溶血，菌落周围呈绿色为 a 溶血。溶血的情 况可以显微镜下用低 【质量控制】金黄色葡萄球菌 ,菌落浅黄色 ,直径＞ 1.5mm 志贺痢疾菌 ,菌落无色 ,直径＞ 1.5mm 铜绿假单胞菌 ,菌落无色或浅绿色 ,直径＞ ★血琼脂培养基 【用途】适用于各类需氧及兼性厌氧细菌生长，一般细菌学检验标本的别离培养、溶血鉴别及菌种保存 【原理】羊血或兔血时细菌生长繁殖的良好营养物质。在 45℃～ 50℃的根底培养基中加参加血液〔 5～10%〕可以保存血液中某些不耐热的生长因子，同时血细 胞不被破坏。假设将 NaCl 的浓度提高到 0.85%,那么可使血平皿经 35℃18～ 24h 后色泽仍然鲜艳。在血平板上除可以观察菌落的形态外，还可以判断溶血的情况：菌 落周围的培养基内红细胞完全破坏为 ? 溶血。菌落周围呈绿色为ɑ溶血。溶血的情况可以显微镜下用低倍镜观察 【成分】牛肉浸出液 1L 蛋白胨 10 氯化钠 5 琼脂 15 无菌脱纤维羊血 60ml pＨ７ .2～ 【制备】将前四项成分混合，加热溶化，校对 pH，置三角瓶内，高压灭菌〔 121℃15min〕后冷至约 50℃ ，参加无菌纤维羊血，旋转式充分摇匀后倾平板。血 琼脂层厚 4mm 。凝固后，抽样置于 35℃培养 18～24h，如无菌生长，冷藏备用。 【接种】取标本增菌培养物或纯培养物划线接种到平板上，置 35℃培养 1～2d，观察结果 【观察结果】在血平板上除可以观察菌落的形态外，还可以判断溶血的情况：菌落周围的培养基内红细胞完全被破坏为 ? 溶血，菌落周围呈绿色为ɑ 【质量控制】化脓性链球菌， ATCC19615，生长良好， ?-溶血。肺炎链球菌， ATCC6303，为ɑ溶血。表皮葡萄球菌， ATCC12228，生长良好，不溶血。 ★巧克力培养基 【用途】主要用于嗜血杆菌的别离，亦可用于奈瑟菌的增菌培养。 【原理】流感嗜血杆菌培养时，需要依赖血液中的 X 及 V 因子方能生长繁殖，当培养基加热至 80～ 90℃时，可使血液中的红细胞破裂，以利于嗜血杆菌，奈瑟 菌等的生长培养。凡疑有这些菌种存在的标本，均应接种巧克力平板。血液标本培养，增菌后又细菌生长，假设移种巧克力平板上，有利于别离更多的细菌。 【成分】牛肉浸出液 1L 蛋白胨 10 氯化钠 5 琼脂 15 无菌脱纤维马血、羊血或兔血 100mlpH ７.2～ 【制备】将前四项成分混合，加热溶化，校对 pH，高压灭菌〔 121℃15min〕后在 80～90℃以无菌方法参加血液，摇匀后置 90℃水浴中。维持该温度 15min，使 之呈巧克力色取出，至室温冷至约 50℃，倾制平板 。凝固后，抽样置于 35℃培养 18～24h，如无细菌生长，冷藏备用。 【接种】将可疑标本直接划线接种于该培养基上，置 35℃普通培养或置含 5%～10%二氧化碳环境培养 18～24h，取出观察细菌生长状况。 【观察结果】流感嗜血杆菌菌落微小 (0.8mm),无色透明、光滑整齐、似露滴状， 48h 后达 1.5mm ，从血液或脑脊液中别离的菌落往往形成液状，菌落较大，老培 养物菌落中心呈凹陷。 【质量控制】流感嗜血杆菌 ATCC10211，生长良好，菌落典型。肺炎链球菌， ATCC6305，生长良好，菌落典型。 【保存】置冰箱， 1 周内用完。 ★营养肉汤 【用途】用于一般细菌的增加培养，参加 1%的琼脂粉亦可作营养琼脂。 【原理】该培养基含有氮及微量无机盐，适宜一般细菌的生长繁殖，因此是最根底的培养基。 【成分】牛肉浸液 1L 蛋白胨 10 氯化钠～〔牛肉浸液可用 3.0g 牛肉膏和 1L 蒸馏水代替〕 【制备】上述各成分混合溶解，校正 pH。分装试管，每管 3～5ml 。高压灭菌〔 121℃15min〕，做无菌试验后冷藏备用。 【质量控制】金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌、化脓性链球菌均生长良好。 ★肉浸液培养基 【用途】供作根底培养用。营养比肉