玉米赤霉烯酮降解酶基因mbZHD的原核表达及其降解.doc

基金项目: 国家科技支撑计划(2015BAK43B01) 公益性行业（粮食）科研专项(201513006) 收稿日期：2017-02-14 作者简介: 柴成梁，男，1984年出生，助理研究员，生物化学与分子生物学 通讯作者: 孙长坡，男，1975年出生，研究员，粮油微生物与质量安全 玉米赤霉烯酮降解酶基因mbZHD的原核表达及其降解毒素初步研究 柴成梁 常晓娇 王楠希 伍松陵 孙长坡 （国家粮食局科学研究院，北京 100037） 摘 要：玉米赤霉烯酮(Zearalenone, ZEN)是由镰刀菌属产生的次生代谢物,是极易污染粮食作物的真菌毒素之一。ZEN具有强烈的雌激素样效应及致癌性，给人类和动物的健康造成巨大威胁。本文在NCBI数据库中进行同源比对，获得了一些ZHD101降解酶的同源基因，其中，一个来源于真菌——杨盘二孢菌(Marssonina brunnea)的蛋白序列与ZHD101具有32%的同源性，基因大小为861 bp。通过化学合成方法得到该全长基因，通过构建E.coli原核表达系统进行蛋白表达，蛋白经亲和色谱纯化后对ZEN分子进行降解活性验证，HPLC结果表明，该蛋白在6小时内对10 μg ZEN分子的降解率为98%，酶活为200 U/mL，从而获得了一个新的ZEN降解酶基因。 关键词: 玉米赤霉烯酮 ZEN降解酶基因 克隆