表皮细胞去分化的体内实验研究.docVIP

PAGE PAGE 13 在体诱导表皮细胞去分化的实验研究 蔡飒 付小兵 雷永红 韩冰 郭永峰 孙同柱 王君 李海红 （中国人民解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室，北京 100037） 提要： 目的 在体诱导表皮细胞去分化，探索与表皮细胞去分化有关的信号通路。方法 包皮皮片去除皮下组织，用中性蛋白酶分离表皮，Ⅳ型胶原反复粘贴表皮去除基底细胞层。处理后表皮片移植于裸鼠全层皮肤下，分别于3，5，7d取出移植皮片，采用免疫组织化学染色，Western blot和RT-PCR等方法检测皮片移植前后表型的改变和ERK MAPK通路各信号分子表达的变化情况。结果 表皮片经去基底层处理后，表皮角消失，CK19，?1整合素，Oct4和p63染色阴性。移植后大部分皮片柔软、红润，存活率为86.3%。移植后存活皮片CK19，?1整合素，Oct4和p63染色阳性细胞分散分布于基底上层，CK10阳性细胞数量减少；CK19，?1整合素，Oct4和p63等指标蛋白及mRNA表达增强，其中以移植5d组最为明显；ERK及上下游信号分子（p- Raf、p-MEK1/2、p-ERK1/2、和c-myc）表达增强。t-MEK1/2和t-ERK1/2移植前后表达无显著差异。结论 处于终末分化阶段的表皮细胞可以向干细胞状态逆转，这个过程可能与ERK MAPK信号通路有关。 关键词：去分化；异种移植；表皮细