电渗流的速率要比分析物中的带电粒子的电泳速率为快-宜兰大学食品科学系.ppt

2011/06/14 2011/06/14 利用毛細管電泳儀測定奶製品中三聚氰胺條件之探討 第33組 B9732063 連偲媁 (乙) B9732071 林瑞辰 (乙) B9732093 尤婕妤 (乙) B9732098 黃翊婷 (乙) 指導教授：張永鍾 老師 任課老師：陳淑德 老師、黃中宜 老師 大綱 三聚氰胺 三聚氰胺對食品的影響 毛細管電泳儀 毛細管電泳儀測定三聚氰胺之條件 結論 毛細管電泳 毛細管電泳 (capillary electrophoresis, CE) 結合電泳和層析技術 以內徑10-100μm的極細毛細管做為分離靜相管柱 外加高壓直流電場為動相驅動力 樣品中各分析成分則因遷移速度和分佈行為上的差異而達成分離 遷移 毛細管電泳的基本分離機制來自樣品中各分析成分的遷移速度差異。事實上，在高壓電場作用下，帶電粒子在毛細管內緩衝溶液(電解質)中的遷移速度等於電泳動和電滲流(EOF)速度的向量和。 (電泳動)：是高壓電場作用下的電泳速度，他和分析成分所帶電性、電荷數以及自身粒子體積大小有關。通常電荷數愈多、體積越小則電泳速率愈快，而電性則關係到方向。 (電滲流)：是因熔矽毛細管內壁的負電荷引發電雙層而產生的電滲流速度。和毛細管材料以及緩衝溶液pH值有關。 一般而言，電滲流的速率要比分析物中的帶電粒子的電泳速率為快，因此其淨遷移速率的向量與電滲流的方向一致，因此可以同時分析陰、陽離子，而中性溶質本身在電場中雖不會移動，卻可隨著電滲流一起流出毛細管。 電滲流 毛細管電泳所用的熔矽毛細管柱，因內徑極細，在pH＞3的情況下，其內壁表面的矽醇基(Si-OH)解離而帶負電，和緩衝溶液接觸時便形成電雙層。 屬於緩衝溶液的電雙層帶正電荷部分，便因而向負極方向移動，形成所謂電滲流。 影響電滲流的主要因素包括：電場強度、緩衝溶液pH值、離子強度和溫度。 毛細管電泳儀測定三聚氰胺之條件 電泳條件1 毛細管有效管長：42cm 緩衝液：pH5，10mM/L檸檬酸-檸檬酸鈉溶液 分離電壓：18kV 檢測波長：204nm 進樣時間：10s 電泳條件2 毛細管有效管長：40cm 緩衝液：pH3.2，20 mM NaH2PO4 分離電壓：25kV 檢測波長：206nm 進樣時間：3s 電泳條件3 毛細管有效管長：40cm 緩衝液：pH6.85，15 mM NaH2PO4，15 mM Na2PO4，80mM的SDS 分離電壓：15kV 檢測波長：214nm 進樣時間：5s 根據文獻表示，兩種不同濃度(1.0, 5.0 μg/mL)的三聚氰胺和HMF標準混合液被添加到牛奶樣本溶解於1% TCA可得到平均回收率為95.94%三聚氰胺。 結論 1. 三聚氰胺的最大吸收波長約在204nm。 2. pH值越低，分離度越好。 3. 樣品中添加1%TCA分離度較好。 4.分離電壓越大，分離樣品所需的時間越短。 參考文獻 1、王彩霞、張全彩、關宏濤，2009，高效毛細管電泳法測定牛奶和奶糖中的三聚氰胺。西北大學學報(自然科學版)，39(4)。 2、丁雙陽、李曉薇、李海燕、郭平、童敬、饒欽雄，2008，高效毛細管電泳法測定牛奶和奶粉中殘留的三聚氰胺。色譜，26(6):755-758。 3、林志城、施明智、張永鍾、梁哲豪、薛文發，2008，儀器分析，13.4-13.9。 4、CHEN, X., YAN, N., ZHOU, L., ZHU, Z. 2009. Determination of Melamine in Dairy Products, Fish Feed, and Fish by Capillary Zone Electrophoresis with Diode Array Detection. J. Agric. Food Chem, 57:807–811. 5、CHEN, Z., YAN, X. 2009. Simultaneous Determination of Melamine and 5-Hydroxymethylfurfural in Milk by Capillary Electrophoresis with Diode Array Detection. J. Agric. Food Chem, 57:8742–8747. Thanks for your attention! SDS： 陰離子型界面活性劑，此類界面活性劑溶於水中時，會解離成界面活性劑陰離子。 * * 三聚氰胺 三聚氰胺（Melamine），化學式為C3N6H6，俗稱密胺、蛋白精。 一種重要的氮雜環有機化工原料，用於生產塑料、防火纖維、阻燃劑等工業品。 亦在部分亞洲國家被用來製造化肥。 （王等，2009） 三聚氰