乳酸脱氢酶--医学生用的生化学习.pptVIP

乳酸脱氢酶 乳酸脱氢酶 LD几乎存在于各种组织中，心、肺、肝、肾、红细胞、骨骼肌和皮肤的急性损伤，以及恶性肿瘤等疾患均致此酶增高，故其特异性差。LD活性增高主要见于心肌梗死、肺梗死、病毒性肝炎、肝硬化、肾脏疾病、某些恶性肿瘤、白血病以及非恶性疾病如传染性单核细胞增多症、贫血、肌营养不良，胰腺炎等。一些肿瘤转移所致的胸膜水中LD活性往往有升高。目前临床主要用于心肌梗死，肝病和恶性肿瘤的辅助诊断。 乳酸脱氢酶 LD由M型和H型亚单位构成5种同工酶，H4（LD1）、MH3（LD2）、M2H2（LD3）、M3H1（LD4）、和M5（LD5）。 不同组织有其特征性同工酶。心肝肾脏和红细胞所含LD同工酶比例相近，以LD1和LD2为主。 乳酸脱氢酶 按照LD同工酶的分布将组织分为3类： 以LD1为主，这类组织以心肌为代表 以LD5为主，这类组织以肝脏肌代表 以LD3为主，以肺、脾为代表 当组织损伤时，其中所含同工酶释放到血液中，引起同工酶活性变化。 乳酸脱氢酶 常用于急性心肌梗死的鉴别诊断。 在急性心肌梗死LD1和LD2活性均升高，但LD1升高更早更明显，导致LD1/ LD2比例增大。 乳酸脱氢酶 LDH在AMI诊断中的评价 1）总LDH不能单独诊断AMI，LDH单独诊断AMI的特异性只 有53%，可用于AMI的排除诊断。 2）LDH在胸痛后8-12h出现，7-12天恢复正常，时间长，可以用于就诊较迟的患者。 3）如果CK-MB和cTn等已经有阳性结果，没有必要检测LDH。 4）LDH不能用于溶栓治疗的监测。 乳酸脱氢酶 是糖酵解和糖异生的一个重要酶。含有锌离子，能可逆催化乳酸（L）和丙酮酸（P）之间的氧化还原反应。 乳酸+NAD+→丙酮酸+NADH+H+ 其中L → P为正向反应， P → L为逆向反应。 乳酸脱氢酶 正反两向反应的最适PH不同，其中正向为8.8-9.8。其优点是乳酸和NAD+稳定性好，且NAD+纯品易得，价格较低，过量乳酸对LD活性抵制较小，反应线性较好，缺点是需要较高的底物浓度，反应速度较慢。 乳酸脱氢酶 逆向反应的最适PH为7.4-7.8，其显著的优点在于NADH用量少，仅为正向反应的3%左右，而反应速度比前者快3倍，灵敏度高 但丙酮酸与NADH的稳定性较差，过量的丙酮酸对LD活性的抑制作用较大。 LD活性测定正反都可应用，但检验学会酶学组专家推荐选择正向反应。 乳酸脱氢酶 不同的LD同工酶以温度的敏感性是不同的，组织提取液若放于-20℃过夜，LD4和LD5将丧失全部的活性。血清标本应放于室温下。如果血清标本需要存放较长时间，应加入10mg/ml的NAD+或3.1mg/ml的谷胱甘肽后于4 ℃保存。 LD活性测定也可用抗凝血浆，但不同的抗凝剂对LD测定的影响不同，草酸盐和EDTA能抑制LD活性，而肝素影响不大。 乳酸脱氢酶 由于红细胞和血小板中含有大量的LD，故严禁使用溶血标本，在采用血浆标本时必须3000转/分离心15分钟除去血小板。 LD活性能被巯基试剂所抑制，硼酸、丙二酸、草酸以及EDTA都是竟争性抑制剂。 * * * * *