半夏试管块茎形成过程中内源激素的变化-中国中药杂志.pdf

第３５卷第８期 Ｖｏｌ３５，Ｉｓｓｕｅ　８ ２０１０年４月 　　　　　　 　 　 　 　 　　　　　　 　 　 　 　 Ａｐｒｉｌ，２０１０ ·资源与鉴定 · 半夏试管块茎形成过程中内源激素的变化 １，２ １，２ １，２ １，２ １ 盛玮 ，薛建平 ，张爱民 ，常莉 ，范成成 （１淮北煤炭师范学院生命科学学院，安徽 淮北２３５０００； ２资源植物生物学安徽省重点实验室，安徽 淮北２３５０００） ［摘要］　目的：通过分析５种内源激素ＩＡＡ，ＧＡ，ＡＢＡ，ＺＲ，ＪＡ在半夏块茎形成过程中的动态变化，初步探讨了半夏试管 ３ －１ －１ 块茎形成的生理生化机制。方法：将半夏叶柄正置入ＭＳ＋６ＢＡ０５ｍｇ·Ｌ ＋ＮＡＡ０１ｍｇ·Ｌ ＋５％蔗糖培养基中诱导形 成块茎，取不同生长时期的小块茎和叶柄，对内源激素进行提取，采用ＥＬＩＳＡ法进行测定。结果：ＩＡＡ，ＡＢＡ，ＪＡ，ＺＲ在块茎膨 大时期迅速上升；ＧＡ的曲线呈倒Ｓ型。结论：在半夏试管块茎形成过程中，内源激素ＡＢＡ，ＪＡ，ＩＡＡ，ＺＲ和ＧＡ起着重要的调 ３ ３ 控作用。 ［关键词］　半夏；试管块茎；内源激素；动态变化 　　半夏ＰｉｎｅｌｌｉａｔｅｒｎａｔａＢｅｒｉｔ为天南星科半夏属 １　材料与方法 的多年生草本药用植物，以块茎入药，是传统的中药 １１　材料 材，有润燥化痰、降逆、止呕等功效，近年来又有半夏 脱毒半夏试管苗由资源植物生物学安徽省重点 ［１］ 抗肿瘤、抗早孕的报道 。 实验室提供，经薛建平教授鉴定为三叶半夏Ｐｔｅｒ 半夏作为杂草性植物，随着荒山荒坡的开发和 ｎａｔａ。在无菌条件下剪取半夏试管苗叶柄，然后正 过度采挖，野生资源趋于枯竭。人工栽培中多年沿 －１ －１ 置入ＭＳ＋６ＢＡ０５ｍｇ·Ｌ ＋ＮＡＡ０１ｍｇ·Ｌ ＋ 用块茎无性繁殖的方法，致使半夏感染病毒严重，产 ［５］ ５％蔗糖的培养基中诱导形成半夏块茎 。培养３０ 量和品质下降，造成人们种植半夏的积极性不高，而 ｄ，每５ｄ取出叶柄０５～１０ｇ，沿叶柄中间剪开， 国内外对半夏的需求却有增无减，其价格逐年攀 提取上下两端的激素。 升［２］。通过组织培养可以达到脱毒和生产人工种 １２　内源激素的提取、纯化和测定 子的目的，关于半夏的组织培养前人有许多报道，如 酶联免疫吸附法 （ＥＬＩＳＡ）测定吲哚乙酸 ［３］ ［４］ 何奕昆 、薛建平等 将试管内诱导的小块茎制作 （ＩＡＡ）、细胞分裂素（ＣＴＫ）、赤霉素（ＧＡ）、茉莉酸 成人工种子栽培后，其块茎产量是栽培苗的２倍，有 （ＪＡ）、脱落酸（ＡＢＡ）含量。其中，细胞分裂素测定 效成分生物碱含量提高了１６倍。但由于试管小块 玉米素核苷（ＺＲ），赤霉素测定 ＧＡ。激素测定方法 ３ 茎