优化硫酯酶表达提高大肠杆菌脂肪酸乙酯的生物合成效率-微生物学报.pdf

杨柳 等/优化硫酯酶表达提高大肠杆菌脂肪酸乙酯的生物合成效率 1681 生 物 工 程 学 报 Chinese Journal of Biotechnology November 25, 2013, 29(11): 1681−1686 /cjbcn ©2013 Chin J Biotech, All rights reserved 生物育种与工艺优化 优化硫酯酶表达提高大肠杆菌脂肪酸乙酯的生物合 成效率 1, 2 1 1, 2 1, 3 杨柳 ，朱至 ，刘爱秋 ，吕雪峰 1 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 中国科学院生物燃料重点实验室，山东 青岛 266101 2 中国科学院大学，北京 100049 3 山东省能源生物遗传资源重点实验室，山东 青岛 266101 杨柳, 朱至, 刘爱秋, 等. 优化硫酯酶表达提高大肠杆菌脂肪酸乙酯的生物合成效率. 生物工程学报, 2013, 29(11): 1681−1686. Yang L, Zhu Z, Liu AQ, et al. Improvement of fatty acid ethyl ester production by optimizing thioesterase expression. Chin J Biotech, 2013, 29(11): 1681−1686. 摘 要: 利用基因工程大肠杆菌直接从头生物合成脂肪酸乙酯 (生物柴油) 的相关研究引起了国内外研究人员的 广泛关注。在本课题组已经构建的能够从头合成脂肪酸乙酯的大肠杆菌菌株KC3 的基础上，通过替换表达不同来 源的硫酯酶，发现表达来源于香樟树的硫酯酶Cc FatB1 基因能够提高脂肪酸乙酯产量。进一步通过共表达Cc FatB1 和大肠杆菌硫酯酶tesA’基因，以及启动子优化，获得了高产脂肪酸乙酯工程菌株KC4 。KC4 菌株在摇瓶条件和发 酵条件下的单位生物量脂肪酸乙酯产率分别为21.4 mg/ (L·OD600)和31.16 mg/ (L·OD600) 。该工程菌株的构建进一步 提高了脂肪酸乙酯产量，显示了通过基因工程改造大肠杆菌从头合成生物柴油的应用潜力。 关键词: 硫酯酶，脂肪酸乙酯，大肠杆菌，基因工程 Improvement of fatty acid ethyl ester production by optimizing thioesterase expression 1, 2 1 1, 2 1, 3 Liu Yang , Zhi Zhu , Aiqiu Liu , and Xuefeng Lü 1 Key Laboratory of Biofuels, Qingdao Institute of Bioenergy and Bioprocess Technology, Chinese Academy of Sciences, Qingdao 266101, Shandong, China 2 University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China 3 Shandong Provincial Key Laboratory of Energy Genetics, Qingdao 266101, Shandong, China Abstract: Biosynthesis of fatty acid ethyl ester (FA