芥菜开花抑制因子SVP表达分析及其与FLC互作的调节位点-园艺学报.pdf

园艺学报，2016 ，43 (8) ：1513 –1524. Acta Horticulturae Sinica doi ：10.16420/j.issn.0513-353x.2016-0400；http ：//www. ahs. ac. cn 1513 芥菜开花抑制因子SVP 表达分析及其与FLC 互 作的调节位点鉴定 * * ** 李朝闯 ，马关鹏 ，杨修勤，王志敏，宋 明，汤青林 （西南大学园艺园林学院，南方山地园艺学教育部重点实验室，重庆市蔬菜学重点实验室，重庆 400715 ） 摘 要：为阐明芥菜开花抑制因子 SVP 基因的表达特性及其与 FLC 蛋白互作的调节机制，从‘青叶 芥’中克隆了 SVP 基因。定量 PCR 分析表明：低温春化途径和长日照光周期途径中 SVP 在叶片和茎尖均 有表达。营养生长初期表达量较低（茎尖和叶片中平均相对表达量分别为 0.56 和 0.35 ），生殖生长早期则 显著增加（春化途径的茎尖和叶片分别为 0.60 和 1.27，光周期途径的茎尖和叶片分别为 0.49 和 1.42）。 茎尖中 SVP 对低温春化的反应比光周期敏感；而叶片中 SVP 对光周期的反应比低温敏感。酵母双杂交和 β –半乳糖苷酶活性测定显示：SVP 蛋白 I 域突变体 SVPE90L 以及K 域突变体 SVPK104C 和 SVPH106I 均会削 弱 SVP/FLC2 蛋白的互作，但不会导致相互作用消失。SVP 蛋白 K 域突变体 SVPR137L 能完全破坏 SVP/FLC2 的互作，但 SVPR137L 仍然能与芥菜 FLC 、FLC 、FLC 和 FLC 相互作用，说明 SVP/FLC 的蛋白互作受 1 3 4 5 2 到 SVP 第 137 位氨基酸的特异性调控。序列比对发现：芥菜 FLC4 和 FLC5 氨基酸序列完全相同，它们与 FLC 仅有 1 个变异位点；FLC 与 FLC 、FLC 、FLC 之间分别有 28 、19、18 个变异位点；FLC 与 FLC 、 3 2 1 3 4-5 2 1 FLC3 、FLC4 或 FLC5 均不相同的位点有 11 个。推测 FLC2 与 FLC 家族其他成员之间的变异位点很可能对 SVPR137L/FLC2 特异性调控有贡献。 关键词：芥菜；SVP；酵母双杂交；开花调控 中图分类号：S 637.1 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2016 ）08-1513-12 Expression Analysis of Flowering Regulation Factor SVP and Identification of Mediation Sites of SVP/FLC in Brassica juncea * * ** LI Chao-chuang ，MA Guan-peng ，YANG Xiu-qin ，WANG Zhi-min ，SONG Ming，and TANG Qing-lin （College of Horticulture and Landscape Architecture，Southwest University ；Key Laboratory of Horticulture Science for Southern Mountainous Regions ，Ministry of Education ；