运用DOE方法降低抗体生产过程中五聚甘露糖水平的工艺开发_徐菲菲.pdfVIP

药 物 生 物 技 术 : Pharmaceutical Biotechnology 2017 ，24 (4 )305 ～ 309 305 运用DOE 方法降低抗体生产过程中五聚甘露糖水平的工艺开发 1，2 2 2 2 2* 2* ， ， ， ， ， 徐菲菲 王太海 杨 玲 沈 俊 徐水清 周新华 (1. 复 ， 200433 ;2. ， 201203) 旦大学生命科学学院 上海 嘉和生物药业有限公司 上海 (DOE) JMP CHO ， 摘 要 通过试验设计 方法和 软件分析快速优化重组 细胞在生物反应器中的培养工艺 保证 (Man5) 。 CD-CIM1 ， 抗体高表达量的同时降低五聚甘露糖 水平 以培养基 为基础培养基 在细胞培养过程中添加补料 ， 3 L ， pH ， (DO) 培养基流加培养 利用 小型生物反应器 对反应器 值 溶氧 ， (T)3 3 2 温度 个控制参数进行 因子 水平比 ， (Titer)、 Man5 ， JMP ， 较 以抗体表达量 产物蛋白 水平为响应变量 应用 软件进行拟合模型最小二乘法分析 找出最优 。 ， 50 L ， ， 。 工艺参数 用优化的工艺参数进行验证 并且放大到 生物反应器中 先后培养两个批次 进一步验证优化结果 ， T 、pH 3 Titer ，DO Titer ;pH Man5 通过分析 参数 值及 因素间两两交互作用对 均有显著影响 对 影响不显著 对 有显 ，T 、DO 3 Man5 。 ， (0% ～ 著影响 及 因素间两两交互作用对 的影响均不显著 结果预测 为获得高表达量及可接受范围 10% ) Man5 ， pH 7. 10 ，DO 60% ，T 34. 5 ℃ 。 ， 内的 水平 最优工艺参数为 用优化工艺在小型生物反应器内进行验证 收 1 152，901 mg /L ;Man5 8. 60% ，7. 49% ; 50 L ， 获时抗体表达量分别为 水平分别为