哺乳动物斯钙素-1STC-1的研究进展.ppt

* * * * * * * 斜体字为信号肽序列，红色的为半胱氨酸残基（11个）。斯钙素前体物需经过加工切除信号肽序列后才能形成激素的成熟形式来发挥作用。 * * 用光密度法测定 * 肌球蛋白轻链启动子序列下游处克隆hSTC-1基因。 * * * * * WT母鼠哺育的两种幼鼠体重明显大于转基因母鼠所哺育的幼鼠，且WT幼鼠转基因幼鼠。 * * * 用实时PCR测得的LH受体转录物水平用β-肌动蛋白表达水平标准化；受体含量采用放射性配体结合测定法所测得。 * 在含有FSH（0.1-30ng/ml）的介质中 * hCG培养液中 * * * * * 粘膜－浆膜钙流量浆膜－粘膜，净的内流量减少，在体外使用电位钳位法测定了大鼠和猪十二指肠组织单向的由粘膜到浆膜（Jm→s）和由浆膜到粘膜（Js→m）的45Ca和32P流量。 * * 这些结果暗示STC能通过降低净的钙吸收，并在血浆磷酸盐水平增加的情况下促进钙在骨中的沉积来显著影响哺乳动物的钙平衡 * * * 体外培养犬肾细胞（MDCK细胞），将其至于高渗介质（含钙离子1.55mM）中，逐渐增加其中EGTA浓度（0-1.55mM），EGTA的作用是螯合介质中的钙离子。24h后，用Northern杂交确定MDCK细胞中STC-1 mRNA丰度。当EGTA浓度达到1.5mM时，显著降低了mRNA的丰度（图1），可认为1.5mM是临界反应值，而此时钙离子的含量为0.05mM，上述结果基于EGTA的作用在于仅降低介质中的钙离子浓度。为了对比EGTA的非特异性作用，MDCK细胞置于非高渗介质中，添加不同浓度的钙离子。高渗透性对STC-1 mRNA的诱导只在介质中钙离子浓度低于0.1mM时才被抑制（图2），该浓度与EGTA临界反应值所反映的钙离子浓度相一致。 * * * * H-89，一种选择性的PKA抑制剂， * 用双丁酰环腺苷酸（1-4mM，dbcAMP）处理小鼠的成神经瘤细胞时发现，dbcAMP使得STC-1 mRNA丰度上调，在处理的最初24和48h，增加了2倍；而96h后增加了14倍 * * * 图14、 STC-1抗血清被动免疫小鼠后乳腺腺泡区域的形态测定结果 ***P0.001 腹股沟和腹部的乳腺重量、乳成分没有差异 Zaidi等，2006 正常血清组 STC-1抗血清组 细胞膜Kd 1.35±0.28 3.46±0.73* 细胞膜Bmax 10.61±0.88 14.63±1.65* 细胞核Kd 0.70±0.19 1.5±0.28* 细胞核Bmax 15.49±1.45 18.61±1.39 线粒体Kd 1.59±0.48 1.99±0.61 线粒体Bmax 10.5±1.3 14.2±1.8 Kd：受体亲和力（nM）；Bmax：受体最大结合率（pmol/mg) 对乳腺亚细胞成分的STC-1受体结合性研究 受体的上调表达，很可能是配体靶向性降低的结果。由此可推断，STC-1对乳腺发育可能具有促进作用。 STC-1基因在大鼠妊娠过程中的子宫内胚胎的植入位点和蜕膜后细胞中表达 STC-1 mRNA在羊妊娠16d后的子宫内膜中急剧增加。 STC-1对哺乳动物的胚胎植入可能具有重要作用 Song等，2006 Xiao等，2006 STC-1 - LH和hCG受体含量 FSH和hCG诱导的孕酮的生成 小结 卵巢颗粒 细胞黄体化 STC-1靶向性降低 - 乳腺发育 STC-1对乳腺发育 可能具有促进作用 STC-1对胚胎植入可能具有重要作用  图15、STC-1对猪（上）和大鼠（下）十二指肠粘膜-浆膜（Jm→s）和浆膜-粘膜（Js→m）钙流量的影响 *P0.05 Madsen等，1998 3.3 对钙磷代谢的影响 钙流量 图16、STC-1对大鼠十二指肠磷酸盐流量的影响 Madsen等，1998 图17、STC-1对大鼠肾脏磷酸盐排泄的抑制作用 Olsen等，1996 磷酸盐排泄量 磷酸盐流量 可能机制 Lu等（1994）指出，STC-1能通过cAMP途径直接促进肾脏磷酸盐的重吸收。 Wagner等（1997）指出，STC-1很可能是通过增强近曲小管Na+/PO43-协同转运载体的活性而实现这种作用的。 小结 STC-1可降低大鼠和猪肠道对Ca2+的净吸收量，并与增加肠道磷酸盐的净吸收量相偶联。此外，STC-1还可促进肾脏对磷酸盐的重吸收。 肝细胞 神经元细胞 肾单位细胞 线粒体膜和基质 具有高亲和力的STC-1受体 STC-1是可以线粒体为靶器官的激素 McCudden 等，2002 Ellard 等，2007 3.4 解偶联作用 与野生型相比，转基