微生物代谢调节 2节.pptVIP

第三章 微生物的代谢调节 第一节 基本代谢的调节 第二节 微生物次级代谢调节 第三节 代谢工程 第一节 基本代谢的调节 1 微生物代谢调节概述 2 微生物代谢调节的生化基础 3?酶合成的调节 4 酶活性的调节 5 其它调节方式 6 微生物代谢的人工控制 1 微生物代谢调节概述 1.2 研究目的与采用方式 研究目的： 在适当条件下，对微生物代谢途径加以控制，高浓度地积累目的产物，来满足生产的需要。采用方式： 通过育种方法得到基因突变株，从根本上改变代谢途径； 控制各种培养条件影响其代谢过程； 利用基因工程技术改变代谢流，扩展和构建新的代谢途径。 (2)代谢速度的调控 细胞透性的调节：主要指大分子的生成协调，如核酸、蛋白质或膜的形成，使细胞能较好地适应内外环境条件的变化。 总之，微生物初级代谢调节 2 微生物代谢调节的生化基础 与膜密切相关的调节主要包括以下4个方面： 膜的脂质(磷脂及其它脂类)的分子结构，以及环境条件（如离子强度、温度、pH等）对膜脂质理化性质的影响。 膜蛋白质(如酶、载体蛋白、电子传递链的成员及其它蛋白质)的绝对数量及其活性的调节。 跨膜的电化学梯度(膜的生理状态)以及胞内ATP、ADP、AMP库和P浓度对溶质输送的调节。 CW结构特别是骨架结构的部分破坏或变形，间接影响膜(膜的物理状态)对溶质的通透性。 2.1.3 酶与底物的相对位置 3? 酶合成的调节(粗调） 酶合成的调节：通过调节酶合成的量来控制微生物代谢速度的调节机制。这类调节在基因转录水平上进行，对代谢活动的调节是间接的、缓慢的。 3.1??酶的诱导 按照酶的合成与环境影响的不同关系，可以将酶分为两大类： 组成酶(Structural enzyme)：它们的合成与环境无关，随菌体形成而合成，是细胞固有的酶，在菌体内的含量相对稳定。如糖酵解途径(EMP)有关的酶。 诱导酶(Inducible enzyme)：只有在环境中存在诱导剂时，它们才开始合成，一旦环境中没有了诱导剂，合成就会终止。 某些诱导酶的正常和高效诱导物 酶的诱导合成类型 同时诱导：当诱导物加入后，微生物能同时或几乎同时诱导几种酶的合成，它主要存在于短的代谢途径中。 顺序诱导：先合成能分解底物的酶，再依次合成分解各中间代谢物的酶，以达到对较复杂代谢途径的分段调节。 3.2??酶合成的阻遏 在某代谢途径中，当末端产物过量时，微生物的调节体系就会阻止代谢途径中包括关键酶在内的一系列酶的合成，从而彻底地控制代谢，减少末端产物生成，这种现象称为酶合成的阻遏。合成可被阻遏的酶称为阻遏酶(repressible enzyme)。 3.2.1 末端代谢产物阻遏 末端代谢产物阻遏:由于某代谢途径末端产物的过量积累而引起酶合成的(反馈)阻遏。 生物合成末端产物阻遏的特点:同时阻止合成途径中所有酶的合成。 若代谢途径是直线式的，末端产物阻遏情况较为简单，末端产物引起代谢途径中各种酶的合成终止。 对于分支代谢途径来说，情况比较复杂，每种末端产物只专一地阻遏合成它自身那条分支途径的酶，而代谢途径分支点前的“公共酶”则受所有分支途径末端产物的共同阻遏。 保证细胞内各种物质维持适当的浓度。 微生物已合成了足量的产物，或外界加入该物质后，就停止有关酶的合成； 缺乏该物质时，又开始合成有关的酶。 3.2.2 分解代谢物阻遏 当细胞内同时存在两种可利用底物（碳源或氮源）时，利用快的底物会阻遏与利用慢的底物有关的酶合成。 这种阻遏并不是由于快速利用底物直接作用的结果，而是由这种底物分解过程中产生的中间代谢物引起的，所以称为分解代谢物阻遏（过去被称为葡萄糖效应）。 反馈阻遏与反馈抑制的性质比较 5 其它调节方式 哺乳动物中的许多酶以活化或钝化的形式存在，二者通过形成或断开共价键进行的。 活化与钝化形式的差别在于有无与蛋白质共价连接的化学物质。 互相转变有时由共价修饰或若干配基的缔合启动的。 5.2 能荷的调节 当细胞中全部是ATP时，能荷最大，为100%；当全部是AMP时，能荷最小，为0；当全部为ADP时，能荷为50%。 (2) 能荷不仅调节形成ATP的分解代谢酶类的活性，也调节利用ATP的生物合成酶类的活性。 改变细胞通透性的方法 A 如限制培养基中生物素浓度在1～5mg/L, 这样可以控制细胞膜中脂质的合成； B 加入青霉素,抑制细胞壁肽聚糖合成中肽链的交联； C 加入表面活性剂如吐温80或阳离子表面活性剂(如聚氧化乙酰硬脂酰胺),将脂类从细胞壁中溶解出来,使细胞壁疏松,通透性增加； D 控制Mn2+、Zn2+的浓度,干扰细胞膜或细胞壁的形成。