螺旋藻净化畜牧业放流水之研究.ppt

螺旋藻淨化畜牧業放流水之研究 一、實驗設備與方法 本實驗所使用的藻類種源為螺旋藻，取自於台南海事學院，因為藻源受到環境中其他藻種的污染，尤其以顫藻的污染最為嚴重，因此本研究首先將混合的藻種進行分離與純化，再將純化的藻種以分子生物的技術進行鑑定，後續以人工配製的BG-11培養基與畜牧場的出流水進行藻種培養，以了解純化的藻種對培養液中氮、磷的移除效果。實驗架構如圖1所示。 1.1螺旋藻純化與鑑定 1.藻種純化 本研究以為吸管法進行藻種的純化，用自製的微吸管，一端接上特製乳膠軟管，再使用顯微鏡和玻璃製微吸管之毛細現象吸取純目標螺旋藻，陸續利用BG-11培養基清洗並分離出純螺旋藻，然後存放入含有3 mL BG-11之10 mL試管中，培養約1星期後，再以顯微鏡觀察進行確認。 2.螺旋藻鑑定和DNA定序 本研究以分子生物的技術進行純螺選藻鑑定，首先萃取藻體的DNA，再以細菌專用的引子(primer)，以聚合配鍊鎖反應(polymeras chain reaction，PCR)進行DNA複製，再以16S rDNA分子選殖( clone )實驗，選擇適當的勝任細胞，插入藻體的DNA片段，最後委託明欣生物科技有限公司與成大核酸實驗室，利用核酸自動定序儀(PE/ABI337 Sequencer)定序。 3.純藻大量培養 本研究使用人工配製的BG-11培養基與養牛場與養豬場三階段式處理過的出流水進行螺選藻的大量培養，培養條件為28℃恆溫，光照狀態分別為12小時照光與12小時不照光， 另提供空氣以補充二氧化碳。BG-11培養基成份如表1，由表中可發現氮源有NO3--N (247 mg/L)與微量的銨氮(NH4+-N)；磷源為正磷酸鹽 (5 mg/L PO43--P)，滅菌冷卻後pH調整為7.4。 本研究所使用的畜牧出流水取自於台南某養豬場和屏東某養牛場三階段處理設施的出流水，其中豬場出流水水體氨氮含量高達580 mg/L導致螺旋藻死亡，所以將原水稀釋2倍和4倍再培養螺旋藻，牛場則直接以出流水培養螺旋藻。 4.水質分析 培養過程，為了解螺旋藻的生長情況，進行相關的水質檢測，檢測的方法與頻率表列入下： 三、結果與討論 3.1 BG-11培養基中之螺旋藻淨化效率分析 1.濁度、葉綠素a、pH之分析結果 螺旋藻在BG-11培養基中生長期間之濁度和葉綠素a變化，第0天到第14天之生長期，濁度由32.1 NTU增加到151 NTU，增為原來的4.7倍，每天約增加7.7 NTU，葉綠素a由154 μg/L增加到1220μg /L，增為原來的7.7倍，每天增加約77μg/L 。 第14天到21天穩定期，濁度都維持在151 NTU，葉綠素a維持在1220.3μg/L ~ 1184.8μg/L。第24天進入死滅期，濁度和葉綠素a都開始逐漸下降。螺旋藻在BG-11培養基中生長期間之pH值，從第0天至第7天pH值略微上升，第7天呈現穩定狀態，pH值維持在11.49到11.74之間，呈現鹼性。 2.正磷酸鹽分析結果 圖2為螺旋藻在BG-11培養基生長期間磷酸鹽的變化，從第0天到第30天，去除率達98％，由此可見螺旋藻對於正磷酸鹽的移除能力佳。 3.氮鹽分析結果 圖3為螺旋藻在BG-11培養基中生長期間之氨氮濃度變化，第0天到第5天，下降率達100％，而在水體pH大於9的情況，NH4+-N會以NH3 氣體逸出，所以此處的NH4+-N降低應是氨氣逸散的結果。 圖4為螺旋藻在BG-11培養基生長期間之硝酸氮濃度分析結果，從第0天到第5天硝酸氮濃度維持在248 mg/L，然而第5天後硝酸氮濃度逐漸減少到第30天硝酸氮濃度為213.2 mg/L，去除率為14％，由此可以發現螺旋藻第0天~第5天為適應期，第5天後開始生長與繁殖，因生長需以硝酸氮為氮源，所以螺旋藻對硝酸氮的移除能力是顯著的。 3.2 豬場出流水之螺旋藻淨化效率分析 1.濁度與pH分析結果 出流水稀釋2倍和4倍之濁度的變化情形，稀釋2倍出流水之濁度，從第7天到第30天逐漸增加，由33.1 NTU增加到136 NTU，每天增加約4.6 NTU。稀釋4倍出流水之濁度從第7天到第30天也是逐漸增加，由17.1 NTU增加到 123 NTU，每天增加約5.1 NTU。 稀釋2倍出流水之pH值從第7天到第14天逐漸下降，由9.2下降到5.6。稀釋4倍出流水，pH值從第0天到第10天逐漸下降，由8.5下降到6.3。 2.總COD分析結果 圖5為稀釋2倍出流水，COD從第16天到第30天逐漸上升，由264 mg/L上升到752 mg/L，每天增加33 mg/L；稀釋4倍出流水，COD從第10天到第30天逐漸增加，由