核酸与核苷类药物概述及合成工艺.pptVIP

临床用于减轻严重脑外伤和脑手术伴随的意识障碍，治疗帕金森氏症，抑郁症等精神疾患。由于胞二磷胆碱是在ATP存在下参与磷脂的合成反应，故合用ATP可提高本品疗效；用于脑外伤，脑出血患者可合用止血剂和防水肿药；用于震颤麻痹可合用L-多巴；用于精神病可合用镇静药。 2、发酵法生产核苷 产率高、周期短、控制容易、产量大。 共同特点： （1）使用磷酸单酯酶活力很强的枯草芽孢杆菌或短小芽孢杆菌为诱变出发菌株； （2）具有特定标记的有变株； （3）发酵培养时需提供限量生长因素。 原菌株： （1）AMP强烈抑制PRPP转酰胺酶的活性，控制总代谢途径； （2）AMP抑制SAMP合成酶； （3）GMP抑制IMP脱氢酶 生产菌株： （1）酶6、7缺失（为腺嘌呤缺陷型）积累IMP---肌 苷（肝炎辅助药）； （2）酶4缺失（为鸟嘌呤缺陷型）积累XMP---黄苷； （3）酶5缺失积累鸟苷。 发酵法生产肌苷 （1）肌苷生产工艺 （2）发酵工艺条件： 碳源为葡萄糖 保证充足的氮源 磷酸盐的影响 Mg+、Ca+有促进作用 生长因子腺嘌呤或酵母粉要亚适量 最适发酵温度为30--34℃，pH6.0—6.2 需大风量,高溶氧和低CO2 发酵法生产肌酐的工艺流程 发酵法生产鸟苷和黄苷 鸟苷产生菌的特征： （1）嘌呤核苷酸分解酶活力强； （2）SAMP合成酶，GMP还原酶缺失； （3）解除AMP、GMP对PRPP转酰胺酶，肌苷酸脱氢酶和GMP合成酶的反馈抑制； 发酵法生产腺苷 以肌苷生产菌（枯草杆菌）为诱变基础菌株。 诱变结果： （1）腺嘌呤回复，腺嘌呤酶缺失； （2）黄嘌呤缺陷型，GMP还原酶缺失； （3）抗8杂氮黄嘌呤解除对PRPP转酰胺酶的抑制； （4）发酵不稳定的原因：黄嘌呤缺陷及腺嘌呤酶缺失与回复（菌种传代中）。 第三节 核酸与核苷类药物的制备举例 （一）叠氮胸苷（Azidothymidine，AZT） 1、结构与性质 AZT是1987美国FDA批准的治疗艾滋病的新药 。AZT的药理作用是人体内经磷酸化后生成了3`-叠氮-2′-脱氧胸腺嘧啶核苷酸，后者取代了正常的胸腺嘧啶核苷酸参与病毒DNA的合成，含有AZT成份的DNA不能继续复制，从而达到阻止病毒增殖的目的。 2、生产工艺 此合成路线的起始原料是胸苷，目前主要是从DNA水解法制备，由于原料来源少，合成路线较复杂，成本很高。 已见报道的胸苷合成方法还有两条途径： ①从2′-脱氧胞苷或2′-脱氧鸟苷或2＇-脱氧腺苷与胸腺嘧啶反应，经大肠杆菌产生的磷酸化酶催化生成胸苷。 ②从鸟苷（300mmol／L）与胸腺嘧啶（300mmol／L）反应，在欧文氏菌AJZ992所产生的嘌呤核苷磷酸化酶和嘧啶核苷磷酸化酶的催化下生成5′-甲基尿苷，然后经化学法合成胸苷。 （二）阿糖腺苷（Adenine arabinoside） 1、结构与性质 阿糖腺苷的化学名称为9-β-D-阿拉伯呋喃糖腺嘌呤，或称腺嘌呤阿拉伯糖苷。 早在1960年就在实验室合成了阿糖腺苷，1969年美国用Streptomyces antibioticus NRRL3238菌株，1972年日本用Strepto－myces hebacecus 4334菌株发酵法分别制备了阿糖腺苷。 1979年用从E．Coli中分离得到的尿嘧啶磷酸化酶和嘌呤核苷磷酸化酶，以固相酶的方法将阿糖脲苷转化为阿糖腺苷。 2、生产工艺 酶-化学合成法 最新的阿糖腺苷的合成法是酶-化学合成法：用尿苷为原料经氧氯化磷和二甲基甲酰胺反应，生成氧桥化合物，在碱性水溶液中水解成阿糖尿苷，然后利用阿糖尿苷中的阿拉伯糖经酶法转化成阿糖腺苷。 经选育从阿糖尿苷酶法合成阿糖腺苷的优秀菌株是产气肠杆菌（Enterbacteraerogens），这株菌能产生尿苷磷酸化酶（Upase）和嘌呤核苷磷酸化酶（Pynpase），用这个菌株的休止细胞作为酶源，从阿糖尿苷和腺嘌呤能高效地合成阿糖腺苷，菌体也可制成固定化细胞进行连续生产。 以5`-AMP为原料的化学合成 3、作用与用途 阿糖腺苷是近年来引人注目的广谱DNA病毒抑制剂，对单纯疱疹Ⅰ、Ⅱ型，带状疱疹，巨细，牛痘等DNA病毒，在体内外都有明显抑制作用。目前认为，阿糖腺苷是治疗单纯疱疹脑炎最好的抗病毒药物。 阿糖腺苷在体内受激酶作用生成的阿糖腺三磷，是脱氧腺三磷（dATP）的拮抗物，从而阻抑了以dATP为底物的病毒DNA聚合酶的活力。而且阿糖腺三磷对于病毒DNA聚合酶的亲和性比宿主细胞的同一个酶的亲和性高。因此这个药物对于抑制病毒具有较高选择