免疫电泳技术的基本原理难点.pptVIP

重点与难点 重点：免疫电泳技术的基本原理 难点：免疫电泳中免疫固定电泳的原理及临床应用 第六章 沉淀反应 第一节 沉淀反应原理及特点 形成肉眼可见的大的免疫复合物。沉淀 线或沉淀环的观察以及免疫比浊法中的 终点法就是测定此阶段形成的复合物 第二节　液体内沉淀试验 表6-1 最适比方阵测定法 当可溶性抗原与相应抗体特异结合，二者比例合适时，在特殊的缓冲液中它们快速形成一定大小的抗原抗体复合物，使反应液体出现浊度。利用现代光学测量仪器对浊度进行测定从而检测抗原含量。 1.抗原抗体的比例：反应体系中保持抗体过量 2.抗体的质量 ：特异性强，效价高，亲和力　　　　　　　强并使用R型抗体 3.抗原抗体反应液的最适PH为6.5～8.5 4.使用增浊剂 1.透射免疫比浊法 2.散射免疫比浊法 3.免疫胶乳比浊法 第三节　凝胶内沉淀试验 可溶性抗原和相应抗体在凝胶中扩散，形成浓度梯度，在抗原抗体相遇并且浓度比例适当的位置形成肉眼可见的沉淀线或沉淀环。 常用的凝胶有琼脂、琼脂糖、葡聚糖或聚丙烯酰胺凝胶。 影响因素： 抗体质量 标准曲线 ，质控血清 结果与真实含量不符 　单克隆抗体；多克隆抗体；可出现假性降低与增高 双环现象 　不同扩散率抗原性相同的两个组分 第四节　免疫电泳技术 优点： 1.加快反应的速度。 2.提高了灵敏度。