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- 2019-07-20 发布于浙江
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2.单色器 作用:从光源的连续光谱分解为单色光, 并准确的分出某一波长范围的光, 作为吸光光度分析的光源。 棱镜: 玻璃350~3200 nm, 石英185~4000 nm; 单色器 光栅: 波长范围宽,色散均匀, 分辨性能好,使用方便 * 入射狭缝 准直透镜 棱镜 聚焦透镜 出射狭缝 白光 红 紫 λ1 λ2 800 600 500 400 棱镜分光示意图 * 3.吸收池(比色皿) 比色皿用于盛参比溶液和被测试液。一般为长方形, 有0.5cm、1.0cm 、2.0cm、3.0cm等规格。 同样厚度比色皿之间的透光率相差应小于0.5%。 玻璃 —仅适用于可见光区 石英 —适用于紫外和可见光区 问题:在使用比色皿的过程中应该注意哪些事项??? 作用:用于盛放盛参比溶液和 被测试液,且决定透光液层厚 度的器件 * * 4.检测器 常用的是:光电池,光电管,光电倍增管。 作用:对透过吸收池的光做出相应,并把它转变成电信号输出,其输出电信号大小与光的强度成正比。 * 5.信号显示器 低档仪器:刻度显示; 中高档仪器:数字显示,自动扫描记录。 作用:放大检测器产生的电信号, 经放大处理后,用一定的方式 显示出来,以便于计算和记录。 * * * * * * 分光光度计的使用 预热20min。 调节T = 0。 调节T = 100% (A=0)。 测定样品的吸光度A。 * 分光光度计的保养与维护 安置在干燥、无污染的地方; 仪器内的防潮硅胶应定期更换或再生; 仪器停止工作时,必须切断电源,应按开关机顺序关闭主机和稳流稳压电源开关; 比色皿使用完毕后,立即用蒸馏水或有机溶剂冲洗干净,并用柔软情节的纱布把水渍擦净; 仪器经过搬动,请及时检查并纠正波长精度。 * 第六节 吸光光度法应用 1、定量分析方法 (1)工作曲线法(适用于成批样品的分析) 配制一系列(4个以上)不同含量的待测组分的标准溶液,以不含待测组分的空白溶液为参比,测定标准溶液的吸光度。并绘制吸光度-浓度曲线,得到标准曲线(工作曲线),然后再在相同条件下测定试样溶液的吸光度。由测得的吸光度在曲线上查得试样溶液中待测组分的浓度,最后计算得到试样中待测组分的含量。 A c Ax cx κb * 2.应用实例 1 邻二氮菲法测定微量铁 (邻二氮菲法主要用于测定铁) 试样经溶解、分离干扰物质后,在试液中加入盐酸羟胺将铁全部还原为Fe2+,加入邻二氮菲显色剂,并加入HAc-NaAc缓冲溶液,pH约为4.0~5.0,显色3~5 min后,以试剂空白为参比溶液,于510 nm波长处测定A值,在工作曲线上查得其含量,即可求得测定结果。 * 2 钢铁中锰的分析 锰是钢铁中有益元素,在炼钢中是良好的脱氧剂和脱硫剂。它以金属固熔体MnS状态存在。试样用HNO3溶解,用H3PO4与Fe3+配合成无色的Fe(HPO4)2-,在催化剂AgNO3作用下,以(NH4)2S2O8为氧化剂,加热煮沸使Mn2+ ,氧化为紫红色的MnO4-,于530 nm波长下测定吸光度,在工作曲线上查得含量,即可计算锰的含量。 * 3 二苯碳酰二肼法测定铬 铬(Ⅵ)在环境分析中很重要,六价铬对人体是有害元素。地表水、地下水或工业废水中常要求测定其含量。方法是在弱酸性介质中,Cr(Ⅵ)与二苯碳酰二肼形成紫红色水溶性化合物,于540 nm波长处测定吸光度,在工作曲线上查得相应的浓度,计算铬的含量。 * Thank you * * (1)入射光非单色光引起的偏离 朗伯-比耳定律只适用于单色光,但所用的入射光多是复合光,因而导致对朗伯-比尔定律的偏离。 设检测器(光电池或光电管)对两种波长的光的灵敏度相同,则可以证明:ε1与ε2 相差愈大,吸收池愈厚,则偏离愈严重。 入射光的波长范围窄,偏离朗伯-比尔定律的程度小。选择最大吸收波长的入射光,不仅有较高的灵敏度,偏离朗伯-比尔定律的程度较小。 * (2)溶液的化学和物理因素引起的偏离 ①由于介质不均匀性引起的偏离:当被测试液是胶体溶液、乳浊液或悬浮物质时,部分入射光还因散射现象而损失,导致实测吸光度增加,产生正偏差。 ②由于溶液中的化学反应引起的偏离:溶液中的吸光物质常因离解、缔合、形成新化合物或互变异构等化学变化而改变其浓度,导致偏离朗伯-比尔定律。 (3)比尔定律的局限性引起的偏离 比尔定律有个局限性,只适用于浓度小于0.01mol/l的稀溶液。 * 第三节 显色反应及显色条件的选择 一、显色反应及要求 1.显色反应:在分光光度分析中,将试样中的待测
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