紫外分光光度法全解.ppt

第一章 紫外光谱 ;吸收光谱的基础知识 紫外吸收光谱的基本知识 紫外吸收光谱与分子结构的关系 紫外光谱在有机化合物结构研究中的应用 ;概述;物质对单色光的吸收定律：;假设一束平行单色光通过一个吸光物体： ; 取物体中一极薄断层讨论：;考虑整个物体：;（二）讨论;3.吸光系数的物理意义 E为单位浓度、单位厚度的吸光度;A = ?Cl ?：摩尔吸光系数,一定λ下，C=1mol/L，l =1cm时的吸光度;C为摩尔浓度(mol/L);5.吸光度具有加和性 A总＝Aa + Ab + Ac + ……;六、偏离Beer定律的因素;（一）化学因素;1．非单色光的影响;续前; 谱带宽度 S 影响 E 和吸收光谱形状 ;2．杂散光的影响 指一些不在谱带宽度范围内的与所需波长相隔较远的光。对末端吸收有影响。;(三)透光率测量误差;暗噪音—与检测器或放大电路中电子元件和线路结构的质量、工作状态等有关。与光讯号无关。;讯号噪音——与光讯号有关;第二节 紫外吸收光谱的基本知识;分子轨道：单键：σσ*；双键：ππ*； 孤对电子：n σ*能量最高 σ能量最低;1.σ?σ*跃迁;1.自旋选律;四、紫外吸收光谱的表示方法;五、吸收带; 2.K带：共轭的π→π*跃迁产生的吸收带 (—CH＝CH—)n，—CH＝C—CO— 特点： ①λmax >200nm ②εmax>104，共轭体系增长， λmax和ε都变大 ③溶剂极性增加，K带长移;4．E带：芳香族化合物的特征吸收带 E1带 λmax ～180nmm,εmax>104 E2带 λmax ～200nm εmax～7000 苯环被发色团取代时，E2与K带合并； 苯环被助色团取代时，E2带λmax和ε都变大 ;图示;五、吸收带;2．发色团和助色团对λmax的影响 含有n→π*或π→π*的基团。例：C＝C；C＝O；C＝S；—N＝N— 等 含非键电子的杂原子饱和基团。 例：—OH，—OR，—NH—，—NR2—，—X）;由于化合物结构变化（共轭、引入助色团）或采用不同溶剂后： 吸收峰向长波方向移动，需要更低能量，叫红移 吸收峰向短波方向移动，需要更高能量，叫蓝移;3. 共轭效应对结构λmax的影响; ;（2）溶剂的pH 影响物质存在型体，影响吸收波长。;第二节 紫外分光光度??? ;续前;类型： ;续前;续前;第三节 紫外－可见分光光度分析方法;3．对比吸收光谱的一致性;二、纯度检查;药物用HCl溶液制成每1ml含2mg的溶液，于310nm处测定吸光度A值（1cm）。规定A不得超过0.05，药物E＝435。杂质限量为：;三、单组分分的定量方法;例：;2.校正曲线法 ;四、多组分的定量方法（两组分）;2．两组分吸收光谱部分重叠;3.两组分吸收光谱互相干扰;2）（等吸收）双波长法;i.分别绘制a,b两组分的吸收曲线 ii.选择?1和?2为干扰组分b等吸收波长;;得: 0.442－0.278=(720-270)Cx