第18章色谱法导论.pptVIP

分配系数K及保留因子k与选择因子α的关系 根据对以上公式处理，对A、B两组分的选择因子，可用下式表示 * 上式表明：通过选择因子α把实验测量值k与热力学性质的分配系数K直接联系起来，α对固定相的选择具有实际意义。如果两组分的K或k值相等，则α=1，两个组分的色谱峰必将重合，说明分不开。两组分的K或k值相差越大，则分离得越好。因此两组分具有不同的分配系数是色谱分离的先决条件。 * * 第18章 色谱法导论 王永钊 catalyst@sxu.edu.cn 化学化工学院B304 高效液相色谱仪 气相色谱仪 * 色谱图 * 教学内容 ? 1. 色谱分离的基本原理和基本概念2. 色谱分离的理论基础3. 色谱定性和定量分析的方法 (下一章讲授) 重点与难点 ? 1. 塔板理论，包括流出曲线方程、理论塔板数(n)及有效理论塔 板数(neff)和塔板高度(H)及有效塔板高度(Heff)的计算2. 速率理论方程3. 分离度和基本分离方程 * 学习目标 ? 1. 熟练掌握色谱分离方法的原理2. 掌握色谱流出曲线（色谱峰）所代表的各种技术参数的准确含义3. 能够利用塔板理论和速率理论方程判断影响色谱分离的各种实验因素4. 学会各种定性和定量的分析方法。 * 色谱法的起源、发展及定义 碳酸钙 菊根粉 石油醚 样品 * 色谱法是一种分离技术 试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在色谱分离柱中的两相间不断进行的分配过程。 其中的一相固定不动，称为固定相; 另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。 * 当流动相中携带的混合物流经固定相时，其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中流出。 * 微观分离过程 * 色谱法分类 1．按两相状态分类 2、按分离机理分类 3、按固定相的形态分类 * 两相状态 两相 状态 流动相 的物态 液相色谱（LC） 气相色谱（GC） 液－固色谱 液－液色谱 气－固色谱 气－液色谱 超临界流体色谱（SFC） * 分离机理 分离 机理 吸附色谱——吸附能力强弱不同 分配色谱——溶解度不同 离子交换色谱——离子交换剂上的亲和力不同 凝胶渗透色谱——在多孔固定相中的选择渗透 亲和色谱 * 固定相的形态 固定相装于柱内的色谱法，称为柱色谱。固定相呈平板（面）状的色谱法，称为平板（面）色谱，它又可分为薄层色谱和纸色谱。 固定相 形态 柱色谱 纸色谱 薄层色谱 * 色谱流出曲线及有关术语 色谱图是以组分的浓度变化作为纵坐标，流出时间作为横坐标的。这种曲线称为色谱流出曲线。 * 基线——操作条件稳定后，仅有流动相通过检测器时，仪器检测到的信号称为基线。 基线 * 峰高——色谱峰顶点与基线之间的垂直距离称为色谱峰高； 峰高AB’ * 色谱峰区域宽度（反映色谱柱或所选色谱条件的好坏） 1. 标准偏差σ：即0.607倍峰高处色谱峰宽度的一半； σ EF的一半 2. 半峰宽：即峰高一半的宽度； 半峰宽GH 3. 峰底宽度：色谱峰 两边的拐点作切线，与 基线交点间的距离IJ 峰底宽度 * 保留值——试样各组分，即溶质在色谱柱或色谱体系中保留行为的度量，反映溶质与色谱固定相作用力类型和大小，与两者分子结构有关，是重要的色谱热力学参数和色谱定性依据。 保 留 值 保留时间 保留体积 死时间 保留时间 调整保留时间 死体积 保留体积 调整保留体积 相对保留值 * 死时间——流动相流经色谱柱的平均时间定义为死时间，以tM表示 tM=L/u　Ｌ－柱长　u－流动相线速度　 死时间OA’ * 保留时间——溶质通过色谱柱的时间，即从进样到柱后洗出最大浓度的时间　tR表示 tR=L/ux　Ｌ－柱长　ux－溶质通过色谱柱的平均线速度　 保留时间 OＢ * 调整保留时间——溶质某组份的保留时间扣除死时间后称为该组份的调整保留时间，即 tR′ = tR-tM 调整保留 时间A’Ｂ * 由于组份在色谱柱中的保留时间tR包含了组份随流动相通过柱子所需的时间tM和组份在固定相中滞留所需的时间tR′，所以tR′实际上是组份在固定相中停留的总时间．保留时间可用时间单位（如s）或距离单位（如cm）表示。 保留时间是色谱法定性的基本