实验 血红蛋白与核黄素的凝胶层析分离 什么是层析? 层析法又称色层分析法或色谱法(Chromatography),于1903-1906年由俄国植物学家M. Tswett首先系统提出来。 他将叶绿素的石油醚溶液通过CaCO3管柱,并继续以石油醚淋洗,由于CaCO3对叶绿素中各种色素的吸附能力不同,色素被逐渐分离,在管柱中出现了不同颜色的谱带或称色谱图(Chromatography)。 为何需要固定相和流动相? 任何层析都有两相:固定相(stationary phase)与流动相(mobile phase),两相互不相溶。 固定相:是层析的基质。 可以是固体物质(如吸附剂,凝胶,离子交换剂等),也可以是液体物质(如固定在硅胶或纤维素上的溶液) 这些基质能与待分离的化合物进行可逆的吸附,溶解,交换等作用。对层析的效果起着关键的作用。 流动相: 在层析过程中,推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或超临界体等,都称为流动相。 柱层析中一般称为洗脱剂,薄层层析时称为展层剂。 层析为何能把混合物分开? 在层析过程中,固定相位置固定不变,并阻止所分离的组分向前移动;流动相相当于固定相作单相运动,并带动所分离的组分向前移动。 由于混合物中各组分的理化性质的差异(吸附力、溶解度、分子形状和大小、分子极性、分子亲和力等),各组分受到的推力和阻力不同,移动速度不同,使混合物中的组分
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