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- 2019-08-04 发布于天津
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* DNA的粗提取与鉴定 一、实验原理 1.血细胞在蒸馏水中会渗透吸水过度而导致细胞膜和细胞核膜的破裂。利用此特性可得到含有DNA的溶液。 2.DNA在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。DNA在物质的量浓度为0.14 mol/L的氯化钠溶液中的溶解度最低,利用这一原理,可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。 3.DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些物质则可以溶于酒精。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。 4.DNA遇二苯胺(沸水浴)会变成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 二、方法与过程 1.制鸡血细胞液(活鸡鲜血经分离或沉淀获得) 0.1g/mL柠檬酸钠100mL 活鸡鲜血180mL 500mL烧杯中,玻棒搅拌,离心、分离或静置沉淀。 2.提取DNA。 ①取血细胞5-10mL+20mL蒸馏水,用玻棒沿一个方向快速搅拌。 ②纱布过滤:滤液中含DNA和其他核物质,如蛋白质。 ③原理:血细胞的细胞膜、核摸吸水胀破,玻璃棒快速搅拌,机械加速血细胞破裂。 ⑴.提取血细胞核物质: ⑵.溶解核内的DNA: 滤液+2mol/L的NaCl溶液40mL,玻棒沿一个方向轻缓搅拌。 ⑶.析出含DNA的粘稠物: ⑷.滤取含DNA的粘稠物: ⑸. DNA粘稠物的再溶解: 在上述溶液中缓缓加入蒸馏水,并沿一个方向轻
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