江苏食品职业技术学院万国富生物化学.pptxVIP

食品微生物技术;实验目的 (1) 熟悉显微镜的构造 (2) 了解显微镜各部件的作用 (3) 掌握显微镜正确的使用方法 (4) 懂得维护仪器 (5) 了解显微镜的构造及成像原理 (6) 熟悉细菌、放线菌、酵母菌、霉菌等微生物的基本形态结构 ; 实验步骤 （1） 取出显微镜时，一手握臂，一手托底座，放置于实验台上。 （2） 插上电源，打开光源。 （3） 将标本玻片放在载物台上，用拨片夹夹住，染色区域位于光源中心。 （4） 先将物镜使用最低倍镜（10X）观察，看着目镜调动粗准焦螺旋（快速），当看到图像由模糊→清晰→模糊时，放慢调动速度，寻找最清晰时即可。 （5） 缓慢旋转物镜切换到高倍镜，稍微调整粗（细）准焦螺旋和玻片位置即可。 （6） 使用油镜时，先用低倍镜确认标本位置，然后降下载物台，在标本上滴一滴香柏油，切换油镜，使香柏油和油镜接触，采用同样方式略微调整粗（细）准焦螺旋（香柏油不能与油镜分开），观察完后要用擦镜纸蘸二甲苯擦油镜和玻片。 （7） 使用完毕后，先放下载物台，切换至最低倍物镜。关闭电源，将电源线盘好，把显微镜放入储存柜中。 ;显微镜下拍摄的霉菌图片;霍乱病原;实验二 酵母菌玻片制作;实验原理 将微生物细胞涂于载玻片上，在经过染色等经过处理后加盖盖玻片即可制得临时玻片用于形态观察。 ;实验步骤 1、擦拭：用纱布将载玻片和盖玻片擦干净2、滴水：取一张洁净的载玻片，在其中央滴一滴清水3、盖片：用镊子轻轻夹住盖玻片的一侧，让另一侧接触清水，缓缓放下盖在材料上，注意不要产生气泡5、染色：在盖玻片的一侧滴一滴碘液，另一侧用吸水纸吸引，反复几次，直至染液染过材料6、整理：用吸水纸将除盖玻片下的多余染液吸干净，临时玻片标本即制作成功 7、观察：临时玻片放置于显微镜观察，先进行低镜下观察，再切换到高倍镜下观察。;实验三 实验器皿的清洗包扎及高压蒸汽灭菌;实验原理 灭菌是指杀死或消灭一定环境中的所有微生物，灭菌的方法分物理和化学灭菌法两大类。本实验主要介绍物理方法的一种，即加热灭菌。 加热灭菌包括湿热和肝热灭菌两种。通过加热使菌体内蛋白质凝固变性，从而达到杀菌目的。蛋白质的凝固变性与其自身含水量有关，含水量越高，其凝固所需的温度越低，在同一温度下湿热的杀菌效力比干热大，因为在湿热情况下，菌体吸收水分，使蛋白质易于凝固；同时湿热的穿透力强，可增加灭菌效力。; 高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。适用于一般培养基、玻璃器皿、无菌水、金属用具。一般培养基在121．3℃灭菌20分钟即可。干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白质凝固就越快，反之含水量越小，凝固缓慢。因此，与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度高（160—170℃），时间长（1—2小时）。但干热灭菌温度不能超过180℃，否则，包器皿的纸或棉塞就会烤焦，甚至引起燃烧，因而一般塑料制品不能用干热灭菌。 为确保实验顺利地进行,要求把实验所用的玻璃器皿清洗干净并干燥，微生物实验还要进行灭菌。为保持灭菌后和无菌状态，需要对培养皿，吸管等进行包扎，对试管和三角瓶等加塞棉塞。 ;实验仪器 仪器：平皿、吸管，试管，玻璃皿，三角瓶等玻璃仪器 其他：牛皮纸或报纸，酒精灯，棉花，高压蒸汽菌锅，电烘箱，线绳,毛刷等。;实验步骤;吸管：洗净、烘干后的吸管，在吸口的一头塞入少许脱脂棉花，以防在使用时造成污染。塞入的棉花量要适宜，多余的棉花可用酒精灯火焰烧掉。每支吸管用一条宽约4~5cm的纸条，以30~50℃的角度螺旋形卷起来，吸管的尖端在头部，另一端用剩余的纸条打成一结，以防散开，标上容量，若干支吸管包扎成一束进行灭菌。使用时，从吸管中间拧断纸条，抽出试管。;试管和三角瓶：试管和三角瓶都需要做合适的棉塞，棉塞可起过滤作用，避免空气中的微生物进入容器。制作棉塞时，要求棉花紧贴玻璃壁，没有皱纹和缝隙，松紧适宜。过紧易挤破管口和不易塞入；过松易掉落和污染。棉塞的长度不小于管口直径的2倍，约2/3塞进管口。 若干支试管用绳扎在一起，在棉花部分外包裹油纸或牛皮纸，再用绳扎紧。三角瓶加棉塞后单个用油纸包扎;放于高压蒸汽炉中灭菌;实验四 酵母菌的计数;实验原理 血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。中间