盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质.pptVIP

盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳 分离血清蛋白质 一、实验目的 1．学习盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理。 2．掌握盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作技术。 3．比较醋酸纤维素薄膜电泳与聚丙烯酰胺凝胶 电泳分离血清蛋白质的效果。; 二、实验原理 聚丙烯酰胺凝胶是由单体(monomer)丙烯酰胺(acrylamide，简称Acr)和交联剂(crosslinker)又称为共聚体的N，N一甲叉双丙烯酰胺(methyleme—bisacrylamide，简称Bis)在加速剂和催化剂的作用下聚合交联成三维网状结构的凝胶。由于这种凝胶具有分子筛的性质，所以对样品的分离作用不仅决定于样品的各组分所带的电荷的多少，而且也与分子的大小有关。其次，此凝胶电泳还有一种独特的浓缩效应，因而较醋酸纤维薄膜电泳，琼脂糖电泳等具有更高的分辨率。 ; 在一定浓度时，凝胶透明，有弹性，机械性能好，化学性能??定，与被分离物不起化学反应，几乎无电渗作用，样品不易扩散，用量少(1～100μg)等优点。聚丙烯酰胺凝胶电泳应用范围广，可用于蛋白质、酶、核酸等生物大分子的分离、定性、定量及少量的制备，还可以测定分子量、等电点等。 ; (一)聚合反应 聚丙烯酰胺是由Acr和Bis在催化剂过硫酸铵(ammonium persulfate，(