遗传性疾病的分子诊断教学课程.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 南方医科大学 HD的分子诊断 针对不同个体运用三条引物进行PCR 扩增，扩增产物变性聚丙烯酰胺凝胶电泳放射自显影鉴定IT 15 基因（CAG)ｎ串联重复序列拷贝数，此法能对超过95％HD 患者诊断和排除诊断。 南方医科大学 七 脆性X综合征 脆性X综合征（fragile X syndrome, FraX）是仅次于Down’s 综合征的又一常见遗传性智力缺陷疾病。 南方医科大学 脆性X综合症 分子机制 1．FMR-1 基因5′端(CGG)n 重复序列异常 2．FMR-1 基因5′端CpG岛的异常甲基化 3．FMR-1 基因缺失 4．FMR-1 基因点突变 南方医科大学 脆性X综合征的分子诊断 1．Southern印迹杂交法 2．PCR法 3．微卫星序列分析法 南方医科大学 第三节 产前（包括胚胎植入前）遗传缺陷的分子诊断 产前诊断（prenatal diagnosis, PND）*就是在胎儿出生以前，通过对某些特异基因进行分析，以判断胎儿是否有某种遗传性疾病的手段。 植入前遗传学诊断（preimplantation genetic diagnosis, PGD）*主要是指在显微操作下从体外受精（in vitro fertilization, IVF）发育至6～8 个细胞期的胚胎中，活检1～2 个卵裂球细胞或直接获取受精前后的极体，通过PCR或FISH，进行快速遗传学诊断，选择正常胚胎植入宫内，从而获得健康胎儿。 南方医科大学 IVF 过 程 南方医科大学 南方医科大学 产前遗传缺陷的分子诊断内容 一、染色体异常分子诊断 二、单基因病的产前（植入前）分子诊断 南方医科大学 一、染色体异常分子诊断 1．荧光原位杂交 2．比较基因组杂交 3．间期染色体转化 南方医科大学 二、单基因病的产前（植入前）分子诊断 1．PND和PGD可诊断的单基因病 2．PND 和PGD 诊断单基因病的分子诊断技术 （1）巢式PCR （2）全基因组扩增（WGA） （3）多重PCR （4）荧光PCR （5）突变分析法 南方医科大学 PND与PGD的适应证 可能孕严重遗传病、先天畸形胎儿的孕妇 有家族史 夫妇一方有染色体异常 服致畸药史、病毒感染史 原因不明的多次流产、死胎等 胎儿发育迟缓 孕妇年龄超过35岁 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 镰刀形红细胞贫血症（Sickle Cell Anemia）是一种隐性基因遗传病。患病者的血液红细胞表现为镰刀状，其携带氧的功能只有正常红细胞的一半。现在医生可以用regular blood transfusion避开伤害患者的大脑来阻止这类疾病的发病，但是，迄今为止还没有能真正治愈的药物。血红蛋白分子结构异常的遗传性疾病，主要症状是贫血。病人衰弱、头晕、气短、心脏有杂音和脉搏增高；血液血红蛋白（Hb）含量仅及正常人（每100毫升血15～16克）的一半；红细胞不仅数量少而且异常；出现许多长而薄，看起来像镰刀的新月形红细胞。当血液脱氧合（不携氧）时，镰刀形细胞大大增多。这种细胞极脆，易破损造成血液血红蛋白低水平。更严重的后果是某些器官的毛细血管被这些长形异常细胞堵塞，这是许多镰刀形红细胞贫血症病人早死的主要原因。镰刀形红细胞贫血病是从双亲处接受Hb突变基因的一种遗传病。只从父母一方得到此异常基因，则仅有约1％的红细胞镰刀形化，这种人只有轻微的镰刀形红细胞贫血症症状，如避免强烈的运动或其他使循环系统紧张的状态，可过完全正常的生活。镰刀形红细胞贫血症是一种“分子病”，即分子结构、特别是蛋白质分子结构发生遗传性变化而造成的病变。异常血红蛋白β链的第6位谷氨酸被缬氨酸所代替。这个疏水氨基酸正好适合另一血红蛋白分子β链EF角上的“口袋”，这使两条血红蛋白链互相“锁”在一起，最终与其他血红蛋白链共同形成一个不溶的长柱形螺旋纤维束，使红细胞扭旋成镰刀形。至于为什么脱氧合血红蛋白镰刀形化而氧合血红蛋白（携氧）不镰刀形化？可以简单解释为：在氧合形式中，血红蛋白亚基的重新排列使β链的口袋不能接受相邻的血红蛋白分子。 患者的血红蛋白和红细胞数目减少一半，出现大量镰刀状红细胞 是一种致死性的疾病 * * * * * * * * * * * * * * 南方医科大学 α地中海贫血的分子机制 南方医科大学 分子诊断方法 (1) PCR法 PCR 法已经成为鉴别缺