植生实验生物091.ppt

本学期植生实验全部结束！ 谢谢大家配合！ * 如用丙酮石油醚则提取剂需用95 %乙醇。 植 物 生 理 学 实 验 陈 瑛 生物091班 1、《植物生理生化实验原理和技术》王学奎主编，高教出版社，2006年 2、 《植物生理学实验指导》（第三版）张志良、瞿伟菁主编，高教出版社，2003年。 参考书 第二周 植物组织水势的测定 植物细胞中渗透势的测定 第四周植物中总铁量的测定 第八周叶绿体色素的提取分离及理化性质的测定 叶绿素a、b的吸收光谱及含量的测定 第十二周 淀粉酶活性的测定 时间安排 一、实验目的 掌握渗透势和水势的测定方法；理解渗透势和水势的概念；并掌握用移液管配制蔗糖溶液的技术。 二、实验主要仪器设备及材料 天平、显微镜、毛细吸管、试管、镊子； 蔗糖、亚甲基蓝、洋葱、波菜。 实验一 、植物组织水势的测定 实验二、植物细胞中渗透势的测定 三、实验原理 ΨW=ΨS+ΨP+ΨM +ΨG ΨS=Ψл= - i c R T 小液流法 四、实验步骤 1、在干洁的试管中配制下列各种浓度的蔗糖溶液各10ml。 最后浓度(M=mol/L) 1M蔗糖母液(ml) 蒸馏水(ml) 0.05 0.5 9.5 0.10 1.0 9.0 0.20 2.0 8.0 0.30 3.0 7.0 0.40 4.0 6.0 0.50 5.0 5.0 0.60 6.0 4.0 2、在另7支试管中用移液管分别注入对应浓度糖液各2ml，每管用镊子放入用剪刀剪取的青菜叶片100片，要浸没在糖液内。封口，每隔数分钟轻摇。 3、60分钟后向装叶的试管中加入亚甲基蓝粉末少许，摇匀，使成兰色。用干洁毛细滴管吸取有色液少许，轻轻伸入同浓度对应管糖液中部，再轻轻挤出一小滴，小心抽出滴管，另换一支滴管，按同法，取另一管带色糖液进行测试，观察有色小液滴升降情况。 4、用镊子撕下洋葱鳞片外表皮(单层、有色)，直接放在滴有不同浓度糖液的载玻片上，使其展开。10分钟后盖上盖玻片，于显微镜下观察细胞质壁分离现象。确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度和不引起质壁分离的最高浓度。找出极限后，用新溶液和叶片重复进行几次，直到确定为止。 五、计算 根据公式Ψл= - i c R T，分别计算植物组织水势和渗透势。 I=1.0 T=273+27℃ R=0.0083 L?MPa/mol?K C=体积摩尔浓度，单位mol/L。 六、思考题 1、为何小液流法测定的是叶片的水势，而质壁分离法测定的是渗透势？ 2、小叶流法中为何加入甲烯蓝，加多加少是否对实验结果有影响？ 七、实验报告 1、目的 2、原理 3、实验步骤 4、实验结果-有签名 5、计算 6、分析 7、思考题 一、实验目的 掌握用比色法测定植物中总铁量的方法，掌握722分光光度计的使用及标准曲线的制作方法。 二、实验原理 Fe2+ + H+ + MnO4- Fe3+ + Mn2+ + H2O Fe3+ + 3CNS- Fe(CNS)3 三、实验主要仪器设备及材料 722分光光度计、天平、容量瓶; 浓盐酸、硫氰化钾、高锰酸钾。 实验三 植株中总铁量的测定 鲜样 干物质 C→ CO2 ↑ H、O →H2O↑ N →NOx ↑ S → H2S 、SO2↑ 105℃杀青 75℃烘干 600℃ 灰化 灰分（灰分元素： 少量N，多数S ,全部的金属元素和不可挥发的非金属元素共60余种） 四、实验步骤 灼烧炭化 1、灰分100mg + 6mol/LHCl 1.0ml溶解，用0.