AML缓解期骨髓脂肪细胞异常与其形成机制的分析.pdfVIP

AML 缓解期骨髓脂肪细胞异常及其形成机制的初步探究 中文摘要 AML 缓解期骨髓脂肪细胞异常及其 形成机制的研究 中文摘要 目的:回顾性分析AML 病人治疗后缓解期和正常对照者骨髓活检切片，定量分析 骨髓脂肪细胞的形态学特性，并分析其与AML 患者预后的相关性。同时，初步 探讨AML 缓解期骨髓异常脂肪细胞的形成机制，为白血病的早期干预和治疗提 供新方向。 方法: （1）AML 缓解期患者和正常者的骨髓活检组织石蜡包埋切片进行免疫组 织化学染色，识别骨髓脂肪细胞。运用自主研发的计算机网格计点法精确定量 63 例AML 缓解患者和63 例临床诊断骨髓基本正常者的骨髓脂肪细胞的含量、 数量、单个脂肪细胞面积及直径，并运用ROC 曲线和Kaplan-Meier 生存分析评 估其和AML 预后的相关性。（2 ）体外分离培养骨髓MSC, 向脂肪细胞方向诱导 分化，将得到的脂肪细胞和从骨髓分离的单个核细胞均给予化疗药物阿糖胞苷 （Ara-C ）的干预，收集上清和细胞，观察化疗后上清对MSC 来源的脂肪细胞功 能的影响。（3 ）从基因水平和蛋白水平观察化疗药物对骨髓单个核细胞功能的影 响，筛选细胞上清中起作用的细胞因子, 体外利用中和抗体阻断实验验证该因子 的作用，从而初步探讨AML 缓解期异常脂肪细胞的形成机制。 结果: （1）AML 缓解期骨髓脂肪细胞的含量和单个脂肪细胞面积分别为 18.0% ± 2 12.0%、1485.4±555.9μ m ，均明显高于正常对照者27.4% ±10.5%、1920.4±374.5 μ m2 （P0.05 ）；此外，AML 缓解患者骨髓脂肪细胞含量和单个脂肪细胞面积 与其年龄、性别和身高体重指数（BMI ）均无明显的相关性（P0.05 ）； （2 ）AML 缓解期骨髓脂肪细胞的含量与RFS 相关性分析中，ROC 曲线下面积 （AUC ）为0.629，脂肪细胞含量达21.5%时，复发率明显增高，无复发生存期 明显缩短（P0.05 ）；与OS 相关性分析中，ROC 曲线下面积（AUC ）为0.636， 脂肪细胞含量达22.5%时，死亡率明显增高，总生存期明显缩短（P0.05 ）；AML 缓解期骨髓单个脂肪细胞面积与RFS 相关性分析中，ROC 曲线下面积（AUC ） 2 2 为 0.515，其界值为986.5μ m ，但单个脂肪细胞面积大于 986.5μ m 与≤986.5 I 中文摘要 AML 缓解期骨髓脂肪细胞异常及其形成机制的初步探究 μ m2 组的无复发生存期无明显差异（P0.05 ）；与OS 相关性分析中，ROC 曲线 2 下面积（AUC ）为0.523，其界值为1236.5μ m ，但单个脂肪细胞面积大于1236.5 μ m2 与≤1236.5μ m2 组的总生存期无明显差异（P0.05 ）； （3 ）AML 缓解患者和正常者骨髓间充质干细胞（MSC ）的形态、表面标记及体 外成脂成骨能力均无统计学差异（P0.05 ）；化疗后单个核细胞上清明显抑制成 脂（P0.05 ），但脂肪细胞化疗后上清对MSC 的成脂能力无明显影响（P0.05 ）； （4 ）骨髓单个核细胞的化疗6h 后的Leptin 、GH 和CTGF 的mRNA 表达量显著 增高，而Resistin 、LRP16 和S100A16 没有明显变化，但蛋白水平只有CTGF 的 蛋白含量较化疗前明显增多。体外加入CTGF 的中和抗体后，化疗后骨髓单个核 细胞上清抑制成脂的过程被阻断。 结论: （1）AML 缓解期骨髓脂肪细胞存在异常，且异常的脂肪细胞与患者的无复发生 存期及总生存期相关。因此，AML 缓解期骨髓脂肪细胞含量可以作为患者预后 不良的一个重要因素，为 AML 的早期干预和治疗提供新思路。 （2 ）化疗后骨髓单个核细胞上