基质金属蛋白酶9通路调节子宫内膜异位症腺上皮细胞侵袭性的研究.PDF

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·554· http://wwwchinagpnet Email:zgqkyx@chinagpnet                     ·论著 · 雌激素介导骨桥蛋白/基质金属蛋白酶9通路调节 子宫内膜异位症腺上皮细胞侵袭性的研究 杨 眉,蒋春樊,哈春芳    【摘要】 目的 探讨子宫内膜异位症腺上皮细胞骨桥蛋白 (OPN)与基质金属蛋白酶9(MMP9)表达与子宫 内膜腺上皮细胞迁移的关系。方法 选取2013年8月—2014年3月于宁夏医科大学总医院因 “卵巢巧克力囊肿”行 剥除术或患侧附件切除术的9例患者异位子宫内膜,同期取行输卵管绝育术的10例患者的正常子宫内膜。子宫内膜组 织培养,分离子宫内膜腺上皮细胞。检测子宫内膜异位症及正常子宫内膜OPN、MMP9蛋白及mRNA表达水平。加入 最适宜浓度的17 -雌二醇,培养最适宜时间,检测子宫内膜异位症腺上皮细胞 OPN、MMP9蛋白表达水平。子宫内 β 膜异位症腺上皮细胞分别进行无意义链siRNA转染和siRNA-OPN转染,以无意义链 siRNA转染作为对照,检测转染 后子宫内膜异位症腺上皮细胞OPN、MMP9蛋白表达水平。原代培养的子宫内膜腺上皮细胞达到90%融合时,配置成 6 1×10/ml细胞悬液。侵袭小室下室分别加入500 l的17 -雌二醇 (100nmol/L)、siRNAOPN及无意义链 siRNA, μ β 培养后在显微镜下取16个固定位置的视野计数穿膜细胞数。结果 通过原代培养技术成功分离子宫内膜腺上皮细胞, 腺上皮细胞成团生长,呈铺路石样,均在细胞胞质检测到OPN及MMP9的表达。子宫内膜异位症腺上皮细胞 OPN、 MMP9蛋白相对表达量分别为 (253±057)、 (312±069),高于正常子宫内膜腺上皮细胞,差异有统计学意义 (t =-2310,t =-1375,P<005)。子宫内膜异位症腺上皮细胞 OPN、MMP9mRNA相对表达量分别为 OPN MMP9 (291±073)和 (333±054),高于正常子宫内膜腺上皮细胞,差异有统计学意义 (t =1681,t =-2362; OPN MMP9 P<005)。OPN及MMP9mRNA均在17 -雌二醇浓度为 100nmol/L,培养时间为48h时达到高峰。培养48h后, β 100nmol/L17 -雌二醇干预的子宫内膜异位症腺上皮细胞OPN及MMP9蛋白表达高于未加药干预,差异有统计学意 β 义 (P<005)。子宫内膜异位症腺上皮细胞经siRNAOPN干扰后,OPN、MMP9蛋白表达水平低于经无意义 siRNA干 扰,差异有统计学意义 (P<005)。不同干预措施处理后,子宫内膜异位症腺上皮细胞穿膜细胞数比较,差异有统计 学意义 (P<005);其中,17 -雌二醇干预的子宫内膜异位症腺上皮细胞穿膜细胞数高于未处理干预,siRNAOPN β 干预的子宫内膜异位症腺上皮细胞穿膜细胞数多于未处理干预,差异有统计学意义 (P<005)。结论 雌激素诱导的 OPN蛋白表达增加导致MMP9的表达上调,可能与子宫内膜异位症患者子宫内膜腺上皮细胞的迁移有关。    【关键词】 子宫内膜异位症;骨桥蛋白质;基质金属蛋白酶-9;雌激素类    【中图分类号】R71171  【文献标识码】A doi:103969/jissn1007-9572201605014    杨眉,蒋春樊,哈春芳.雌激素介导骨桥蛋白/基质金属蛋白酶9通路调节子宫内膜异位症腺上皮细胞侵袭性的 研究 [J].中国全科医学,2016,19(5):554-559.[wwwchinagpnet]    YangM,JiangCF,HaCF.Up-regulationofmatrixmetalloproteinase-9viaactivationoftheosteopontininducedby estrogencorrelate

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