(一)从基因文库中获取目的基因 将含有某种生物不同基因的许多DNA片断,导入到受体菌的群体中,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库 二、基因表达载体的构建 2、将目的基因导入动物细胞 (1)方法:显微注射法 (2)程序: 3、将目的基因导入微生物细胞 (1)思考:为什么选用微生物作为受体细胞? (2)方法: 四、目的基因的检测和鉴定 四、目的基因的检测和鉴定 多细胞生物的检测,将每个受体细胞单独培养并诱导发育成完整个体,检测这些个体是否摄入目的基因,摄入的基因是否表达(是否表现出相应的性状)。淘汰无变化的个体,保留有相应变化的个体进一步培养、研究。 * * §1.2 基因工程的基本操作程序 基因工程基本操作的四个步骤 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定 原核细胞的基因结构 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 编码区下游 与RNA聚合酶结合位点 启动子 终止子 RNA聚合酶能够识别结合位点,并与其结合。 转录开始后,RNA聚合酶沿DNA分子移动,并以DNA分子的一条链为模板合成RNA。 转录完毕后,RNA链释放出来,紧接着RNA聚合酶也从DNA模板链上脱落下来。 真核细胞的基因结构 编码区 非编码区 非编码区 与RNA聚合酶 结合位点 内含子 外显子 能够编码蛋
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