基因工程原理 第12章 植物基因工程.pptVIP

双元载体 Ti质粒的vir基因的功能是以反式方式来实现的 vir基因和包含转化基因的卸甲T-DNA可以由不同的质粒提供——双元载体 * 根瘤农杆菌叶盘转化 * 农杆菌与单子叶植物 大部分单子叶植物在农杆菌的宿主范围之外 受伤的单子叶植物不能产生足够水平的酚类物质来诱导vir基因表达 农杆菌转化水稻是第一个得到转化的谷类植物 单子叶植物的受伤位点倾向于木质化 添加酚类物质，增强毒性功能 * 高容量双元载体 非常大的基因分析或者多基因的转化 BIBAC2，包含一个F质粒的复制起始位点，并且模仿细菌人工染色体 反式提供高水平的VirG和VirE的毒性辅助质粒 TAC，模仿P1人工染色体的载体 用于由突变确定的基因的定位克隆 * 根毛农杆菌与Ri质粒 毛根农杆菌引起植物毛状根疾病，它是由根诱导质粒（Ri）引发的 Ri质粒是类似于根瘤农杆菌的Ti质粒 Ri T-DNA在植物中通过有性方式传递，并影响多种形态学和生理学性状，但通常可能不具有毒性 * DNA直接转化植物 原生质体转化 扩大农杆菌的宿主范围 聚乙二醇、电转化 原生质体转化的主要限制不在于基因转化过程本身，而是在于宿主物种从原生质体再生的能力 * 基因枪 使用金属颗粒包裹DNA，以足够穿透细胞壁的速度打入植物细胞。 TMV轰击洋葱表皮 大豆、烟草、玉米 应用范围没有限制，完全由物理参数控制 * 整株（in planta）转化