人类对苯硫脲尝味能力的遗传分析.docVIP

人类对苯硫脲尝味能力的遗传分析 高熹 168615140001 一、实验目的 通过人群中对苯硫脲尝味能力的测试，学习其特殊的试验方法，认识人体对苯硫脲敏感性的遗传特征。 二、实验原理 苯硫脲英文缩写为PTC，是一种白色晶体有刺激性气味的有毒物质，是一种白色结晶状药物，硫脲的苯基衍生物。由于含有N-C=S基，所以有苦涩味。主要用作各种族人群的遗传学分析用途，一个人能否尝出苦涩味是由其基因决定的，与所属民族有关。 由于基因表达的不同，不同人对该物质的味觉敏感度不同。有的人能尝出1/750,000～1/50,000PTC浓度溶液的味道(苦味、苦涩、少数人感到甜味)，这些人称为尝味者(AD);有的人只能尝出PTC浓度大于1/24,000溶液的味道，这些人均称为PTC味盲者(AR)。PTC味盲是隐性遗传，因此如果父母都是苯硫脲味盲，那么子女也必定是味盲。因此，在DNA的亲子鉴定诞生之前，曾经用苯硫脲尝味试验来作为双胞胎、亲子鉴定的参考资料。 苯硫脲这种物质要么味道非常苦，要么几乎没有任何味道，这主要取决于一个人的遗传情况，但也与生活习惯有一定的关系。研究显示，吸烟者和长期饮用咖啡或茶的人往往对PTC更不敏感，需要更高浓度的PTC溶液才能尝出苦味。这意味着，人类能感受出苦味的性质可能最初是出于自身防御的目的，因为自然界中很多苦味物质也往往是有毒的，因此通过辨别出这些物质，可使人类避免受到这些有毒物质的伤害。 PTC含有N-C=S苦味官能团，人类的其受体都为TAS2R38，位于人类7号染色体上。苯硫脲尝味符合孟德尔遗传规律，尝味由显性基因T决定，味盲由隐性基因纯合子tt所决定。卷心菜、绿花椰菜及其他十字花科植物也含有类似的硫脲类物质，因此食用的时候，有些人觉得这些菜特别的苦，不喜欢吃此类食物，而有些人则尝不出其中的苦味。 正常尝味者基因型为TT，能尝出1/750,000～1/6,000,000 g/mL PTC液的苦味。 杂合子尝味者基因型为Tt，能尝出1/48,000～1/380,000 g/mL PTC液的苦味。味盲者基因型为tt，能尝出1/24，000 g/mL 及以上PTC液的苦味。 中国汉族人群中，PTC味盲约占9%。已知味盲者易患结节性甲状腺肿，因此可以把PTC的尝味能力作为一种辅助性诊断指标。苯硫脲味盲者在各种族人中的比例约为：澳洲和新几内亚土著42%，白种人28%，日本人9%，汉族9%，美洲原住民2%。苯硫脲味盲在新疆各族人群中的比例大致为：柯尔克孜族42%，哈萨克族34%，乌兹别克族30%，维吾尔族28%，塔塔尔族28%，锡伯族20%，汉族9%。 三、实验器材、材料和试剂 广口瓶（装有梯度浓度的苯硫脲溶液）、一次性长塑料滴管。 四、实验步骤 PTC溶液配制方法：PTC粉末0.65g，加蒸馏水500mL，在室温下溶解，其浓度为1/750，记为1号液。取一号液稀释1倍为2号液，取2号液稀释1倍为3号液，依此类推，直至14号液。14号液的浓度为1/6*10^-6。 1）将整套（1-14号）PTC溶液按照浓度由低到高依次排开。 2）实验者从最低浓度开始，吸取瓶中PTC溶液，滴在舌根部，仔细品味。 3）从低浓度到高浓度依次品尝，直到感受到溶液的味道“苦”为止，记下最后品尝PTC溶液的序号。 4）统计全班最后品尝PTC溶液的序号。 5）按照序号将结果分为三类，分比为TT纯合（1-6号）、Tt杂合（7-10号）与tt味盲（11-14号）。 五、实验结果及分析 1）全班统计结果TT 1人 Tt 16人 tt 11人 2）基因型频率TT 3.57% Tt 57.14% tt 39.29% 3）基因频率p（T）=32.14% q（t）=67.86% 4）哈迪温伯格平衡时的基因频率p2TT 10.33% 2pqTt 43.62% q2tt 46.05% 通过测得的基因型频率和预测的Hardy-Weinberg平衡的基因型频率进行比较，我们可以发现，全班同学这一群体并不是平衡群体。由于哈迪温伯格法则有适用条件是理想群体：无穷大，随机交配，没有突变，没有迁移和自然选择。最可能的原因是选取的样本过小导致结果有较大的偏差。 同时，可以注意到的是，汉族人中PTC味盲为9%,而全班却接近40%，偏差程度很大，不排除同学们尝味不仔细的可能。由于苦味在舌头根部感受最为灵敏，可能同学们在滴溶液的时候，没有准确地将PTC溶液滴到舌头的根部，导致过多的“味盲”出现。当然，也不能排除样本过小的可能性。 实验改进：可以采取书本上使用的双盲法进行PTC溶液尝味试验，可以更好地排除心理等其他因素的影响。 六、注意事项 1）谨防滴管接触受试者的口腔，避免交叉污染，否则应立即更换洁净滴管。 2）PTC溶液本身有一定的毒性，避免吞咽，实验结束后应漱口。 3）为了保证实验结果的准