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限制酶所识别的序列有什么特点 限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。 5. 在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ） 同种限制酶 B. 两种限制酶 同种连接酶 D. 两种连接酶 提醒 ①唯一不涉及到碱基互补配对的操作步骤。 ②微生物做受体细胞主要是个体微小,代谢旺盛, 繁殖速度快,获得目的基因产物多。 ③植物细胞还可用基因枪法和花粉管通道法。 (4)目的基因的检测和表达 5.利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所 需要的产品。下列选项中能说明目的基因完成了 在受体细胞中表达的是 （ ） A．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因 B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA C．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列 D．酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白 D 2.(2009·重庆卷,2)下表有关基因表达的选项中,不 可能的是 ( ) 兔血红蛋白 兔成熟红细胞 兔血红蛋白基因 D 动物胰岛素 大肠杆菌工程菌细胞 动物胰岛素基因 C 人酪氨酸酶 正常人皮肤细胞 人酪氨酸酶基因 B 细菌抗虫蛋白 抗虫棉叶肉细胞 细菌抗虫蛋白基因 A 表达产物 表达的的细胞 基因 解析 细菌抗虫蛋白基因可通过转基因技术转入 棉花体内,在棉花的叶肉细胞中表达产生细菌抗虫 蛋白,使棉花具有抗虫能力;人酪氨酸酶基因可在 正常人的皮肤细胞中表达产生酪氨酸酶,酪氨酸酶 催化酪氨酸转化为黑色素;动物胰岛素基因可通过 转基因技术转移到大肠杆菌体内,在大肠杆菌工程 菌细胞中合成动物胰岛素;兔属于哺乳动物,其成 熟的红细胞中没有细胞核,所以不可能表达出血红 蛋白。 答案 D 4.在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因 (kanr)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因 的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获 得抗虫棉的技术流程。 请据图回答： (1)A过程需要的酶有 。 (2)B过程及其结果体现了质粒作为载体必须具备 的两个条件是 。 (3)C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和 激素外,还必须加入 。 (4)如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检 测,D过程应该用 作为探针。 点,以便与外源基因连接;三是具有某些标记基因, 便于进行筛选等。B过程体现出了其中的一、三两 条。转基因植株与非转基因植株杂交后,后代表现 型比例为1∶1,说明转基因植株为杂合子,该杂交 过程相当于测交;如果自交,则后代比例应为3∶1; 卡那霉素对花粉进行了选择,保留下了抗卡那霉素 的植株。 答案 (1)限制酶和DNA连接酶 (2)具有标记基因; 能在宿主细胞中复制并稳定保存 (3)卡那霉素 (4)放射性同位素(或荧光分子)标记的抗虫基因 3.基因工程中,需使用的限制酶切割目的基因和质粒, 便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切 点是—G↓GATCC—,限制酶Ⅱ的识别序列和切点 是—↓GATC—。 (1)根据已知条件和图回答： ①上述质粒用限制酶 切割,目的基因 用限制酶 切割。 ②将切下的目的基因片段插入质粒的切口处,还要 加入适量的 。 ③请指出质粒上至少要有一个标记基因的理由： 。 (2)不同生物的基因可以拼接的结构基础是 。 答案 (1)①Ⅰ Ⅱ ②DNA连接酶 ③检测重组质 粒(或目的基因)是否导入受体细胞 (2)DNA结构 基本相同 5.如图为利用生物技术获得生物新品种的过程,据图 回答： (1)在基因工程中,A→B为 技术,利用 的原理是 ,其中①为 过程。 (2)加热至94℃的目的是使DNA中的 键 断裂,这一过程在细胞内是通过 的 作用来完成的。 (3)当温度降低时,引物与模板末端结合,在