生物学常用试剂配制.docVIP

常用试剂 储存注意事项：储存于阴凉、通风的地方；远离火种、热源。避免光照。室温不 超过30℃，相对湿度不超过80％。包装必须密封，切勿受潮。应与易（可）燃物、还原剂、碱类、醇类、食用化学品分开存放，切忌混储，储区应备有合适的材料收容泄漏物。 操作注意事项：尽量在通风橱操作，加强通风，避免粉尘扩散。远离易燃、可燃物，避免与还原剂、碱类、醇类接触，防止包装及容器损坏。 0.5M EDTA（PH 8.0） 组分浓度: 0.5 mol/L EDTA（MW：372.24） 配制量: 500ml 配制方法: 1．称取93g Na2EDTA·2H2O置于500ml蓝盖瓶中。 2．加入400ml的去离子水，置于磁力搅拌器上充分搅拌。 3．用NaOH调节调节pH值至8.0（约需加入20g固体NaOH），当pH 接近8.0时， EDTA方可完全溶解，加入去离子水定容至1L。 4．高温高压灭菌后，室温保存半年。 5M NaCl 组份浓度： 5mol/L NaCl (MW：58.5) 配制量： 1L 配制方法： 1.准确称取氯化钠292.5g，置于1L的蓝盖瓶中。 2.用去离子水溶解并稀释至1L。 3.高温高压灭菌后，常温保存。 2.5M CaCl2 组份浓度：2.5mol/L CaCl2 (MW：110.98) 配制量： 50ml 配制方法: 1.准确称取氯化钙 g于50ml的conical tube中。 2.用去离子水溶解并稀释至500ml，用0.22μm滤膜过滤除菌滤膜过 滤除菌到进口的conical tube。 3.贮存于4℃。 50% 甘油 组分浓度： 50%(V/V) glycerol 配制量： 100ml 配制方法: 1. 量取下列试剂，置于250ml蓝盖瓶 中： 100% glycerol 50ml 2.加入50ml去离子水，充分搅拌溶解。 3.高温高压灭菌，4℃保存。 4.使用时，到超净台分装。 Amp-氨苄青霉素（钠盐） 放置：置于4°C冰箱 配方及配法： 配成200mg/ml的1000*溶液储存(40g溶于200ml蒸馏水中)， 溶解后在超净台用注射器过滤灭菌分装，置于-20°C冰箱第二层， 以1*的终浓度（200ug/ml）加入培养基。 Kan-卡那霉素（硫酸根） 放置：置于试剂柜 配方及配法： 配成20mg/ml的1000*溶液储存(4g溶于200ml蒸馏水中)， 溶解后在超净台用注射器过滤灭菌分装，置于-20°C冰箱第二层， 以1*的终浓度（20ug/ml）加入培养基。 DTT（二硫苏糖醇） 放置：置于-20°C冰箱顶层 配方及配法： 1M DTT的配制：溶解7.7g IPTG 于50 mL水中， 溶解后分装成1。5ml管，置于-20°C冰箱第二层 使用浓度为1-10Mm PMSF（苯甲基磺酰氟） 放置：试剂柜 0.1M PMSF的配制： 分子量 174.19 保存 室温保存，配成PMSF溶液后需-20℃保存。 配制 溶解0.87g的PMSF于足量的异丙醇中，定容到50ml。分成小份贮存于―20℃。 工作浓度 1mM 注意：有毒，对呼吸道粘膜、眼睛和皮肤有很强的危害性，配制时请在通风橱进行，并穿实验服及戴一次性手套。 10×TE Buffer（pH 8.0） 组份浓度: 100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA 配制量: 1L 配置方法 1. 量取下列溶液，置于1L蓝盖瓶中。 1.0M Tris-HCl Buffer（pH8.0） 100mL 0.5M EDTA（pH8.0） 20mL 2. 向蓝盖瓶中加入约800mL的去离子水，均匀混合。 3. 将溶液定容至1L，高温高压灭菌。 4. 室温保存半年。 注意：此为贮存液，使用时稀释100倍，用于PCR纯化和质粒提取后产物保存。 0.5M PIPES （PH 6.7） 配制量：10 ml（MW:302.4） 配制方法： 1. 称取1.5g，加入到15 ml塑料离心管内。 2. 加8 ml的水，搅拌溶解。 3. 用5M KOH 调PH至6.7 4. 0.22um滤膜过滤，-20℃ 保存。 1.5M Tris-HCl（pH8.8） 组份浓度: 1.5 mol/L Tris-HCl 配制量: 1L 配制方法: 1.称取181