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- 2019-08-02 发布于天津
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仪器分析实验 荧光法测定维生素B2药物中核黄素含量 【实验目的】 1.了解荧光分光光度计的主要结构及工作原理。 2.掌握荧光分析方法。 【实验原理】 维生素B2 在230~490 nm范围波长的光照射下,激发出峰值在526 nm左右的绿色荧光,在 pH为 6~7范围内荧光强度最大。基于上述性质建立核黄素的荧光分析法,选择合适的激发波长、荧光波长和实验条件,即可进行定量测定。 在稀溶液中,当入射光强度、样品池厚度、仪器工作条件不变时,测得的荧光强度与荧光物质的浓度成正比。 If = κc 【实验步骤】 1. 实验条件的选择 (1)激发光波长和荧光波长的选择 25 mL 比色管 + 1.00 mL 100 μg·mL-1 核黄素标准溶液 ————————→ 摇匀——→ 固定荧光波长526 nm—→扫描激发波长(220~500 nm )。 固定激发波长为442 nm —→扫描荧光波长(400~700 nm 范围),确定最大荧光强度。 反复:固定激发扫发射,固定发射扫激发,确定最佳激发和发射波长。 (2)酸度的选择 (25 mL 比色管) 2.标准曲线的绘制(25 mL 比色管) 3.样品测定 (1) 药片
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