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一、实验目的和要求 了解植物细胞有丝分裂过程,掌握各时期的主要特征。 掌握顶端分生组织的细胞特点。 学习根尖压片技术。 二、实验用品与材料 常规用品:生物显微镜;载玻片;盖玻片;培养皿;镊子;双面刀片;解剖针;纱布;吸水纸;擦镜纸等。 材料:洋葱根尖纵切片,大蒜根尖 药品:卡诺固定液,50%乙醇,1当量盐酸溶液,苯酚品红染液,蒸馏水。 三、实验内容 1.根尖顶端分生组织 位置: 细胞特点:细胞小,基本为等径,细胞壁薄,细胞质较浓 ,核相对较大,液泡少而小,分裂能力强;细胞排列整齐,无细胞间隙:细胞内基本无后含物。 2.根尖压片技术 * * 实验四 植物细胞的有丝分裂和分生组织、根尖压片技术 大蒜根尖临时压片标本的制作 1)培养及取材 培养:将蒜鳞茎(或洋葱鳞茎)固着好,放在装有水的烧杯或培养皿上,置室温或培养箱中(25℃)培养3-5d 长出白色根。 取材:待根长到1cm时,选择根尖分裂旺盛时期取材,最好在半夜12时左右。为实验方便,每天上午10-11时,下午3-4时之间也可。 2)固定 从根尖顶端剪下5mm左右根尖放入卡诺固定液,固定20-30min后取出,再放入清水中洗10-20min,即可制片。也可将其保存于70%的酒精中备用。 3)解离 每2人1组,每人取4条大蒜根尖,放入小烧杯内,用50%酒精冲洗,再放入1N盐酸溶液,60°C水浴解离15min,弃去盐酸,用吸管吸取清水,反复冲洗5-6次,然后用镊子取一根尖置于载玻片上。 4)染色和压片 切取大蒜根尖顶端2-3mm (呈白色的一端),加1-2滴品红染液染色10-15min,盖上盖玻片。用手或橡皮头轻压盖玻片,使细胞散开,置于镜下观察有丝分裂的情况。核及染色质均被染成鲜红的紫色,细胞质无色或淡粉色(注意观察染色体的数目和形态)。 3.有丝分裂的观察 (1)间期 核仁清晰,核质均匀 (2)细胞核分裂期 前期:染色质细丝进一步螺旋化,变粗变短,出现染色体,核膜、核仁消失,纺锤丝开始出现。 中期:染色体排列于细胞赤道板上或呈放射状散开(极面观)。 后期:染色体自着丝点分离,成为两组子染色体,在纺锤丝的牵引下分别移向细胞两极。 末期:染色体到达两极,解螺旋,并密集成团,至核膜、核仁重新出现,形成两个子核。 大蒜根尖有丝分裂各时期形态图
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