特异性泛素蛋白酶22在急性白血病细胞中的表达及其临床意义.pdfVIP

IV 摘要 特异性泛素蛋白酶22在急性白血病细胞中的表达及 其临床意义 研究生 徐志阳 导师 孙玲 郑州大学第一附属医院血液科 郑州 450052 摘 要 背景 急性白血病(acute1吼Ikemia，AL)是一组血液系统常见的异质性恶性克隆 性疾病，系造血干细胞或祖细胞突变引起的造血系统恶性肿瘤。据统计我国国 家癌症中心2009年收集104个肿瘤登记处资料显示登记地区白血病发病率为 5．68／10万，约占全部新发恶性肿瘤的1．99％，死亡率约4．28／lO万，在恶性肿瘤 死亡位于第9位【l】。人类白血病的确切病因至今未明。病毒、遗传因素、放射、 化学毒物或药物等许多因素被认为与白血病的发病有关。目前，急性白血病治 疗方法主要是化学药物治疗和／或造血干细胞移植。尽管化疗可以使大部分白血 病患者的病情获得缓解，但是只有少数患者能够长期生存，而且化疗的细胞毒 作用不仅对人体产生不良反应影响身体健康和生活质量，还增加了二次肿瘤的 风险。随着医学科学技术的不断发展，靶基因或靶蛋自在疾病的发生、发展及 治疗等方面的研究不断深入，尤其在肿瘤方面，靶向药物特异性选择与致癌基 因或蛋白结合，发生反应，最终使肿瘤细胞死亡，使肿瘤治愈成为可能。 干细胞(stemcells，SC)是一类具有自我复制能力的多潜能细胞。在一定 条件下，它可以分化成多种功能细胞。在多种实体肿瘤中都存在少数具有干细 胞特性，即自我更新能力和多向分化潜能的细胞亚群，美国癌症研究协会于2006 stemcell，CSC)川。现已在血液系 年对这种细胞亚群被称为肿瘤干细胞(caJlcer 统肿瘤、乳腺癌、脑肿瘤、结肠癌、前列腺癌、胰腺癌等中证实了csc的存在。 摘要 CSC与肿瘤的发生、发展、浸润、转移及治疗耐受密切相关，将成为治疗癌症 的新靶点【3】。相关研究表明：USP22可能也是肿瘤干细胞的潜在标志之一【4‘7J。 uSP22是泛素水解酶家族成员之一，泛素水解酶属半胱氨酸蛋白酶家族， 其作用是将泛素与蛋白底物分离开，以此来调控泛素化过程【8J。USP22作为一种 新的预测转移和预后不良的分子标记基因，已被证实在多种实体肿瘤的病理发展 过程中扮演一个重要角色，包括前列腺癌、乳腺癌、肺癌、胃癌、大肠癌等等14’ 17理】，并且其表达程度与肿瘤转移潜能、化疗耐药性及患者预后密切相关。目前 关于USP22在急性白血病细胞中的表达情况报道较少。 目的 本研究通过检测USP22 NB4细胞系表达量情况，并检测初诊急性白血病患者及部分缓解期患者USP22 表，探讨其在急性白血病细胞中的临床意义。 方法 mRNA的表达：骨髓穿刺抽取急性白血病患者及阴 1．qImPCR检测usP22 性对照者骨髓液4ml，用人外周血淋巴细胞分离液分离出单个核细胞，另取对数 mRNA的表达。 法提取总RNA，采用qImPCR检测USP22 2．Westem blotting法检测USP22蛋白的表达：骨髓穿刺抽取急性白血病患者 及阴性对照者骨髓液4ml，用人外周血淋巴细胞分离液分离出单个核细胞，另取 液提取蛋白，采用Westemblotting法检测USP22蛋白的表达。 3．对所有初诊急性白血病患者进行常规化疗方案化疗，一疗程化疗后，比较 USP22表达与初诊白血病患者获得缓解情况的关系。 4．统计分析：应用统计学软件sPssl7．O分析。实验组与阴性对照组间采用 独立样本f检验进行比较。显著水平用P值是否O．05来确定。 结果 1．USP22 摘要 1．05士O．33，初诊组、缓解组与阴性对照组进行比较，均具有统计学意义(氏O．001)； O．69士0．23、0．78士O．18、0