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电子克隆简介 南京农业大学生命科学学院 沈文飙 精选 * 什么是电子克隆 拼图游戏一样的原理 应用 如何做拼图游戏 常用软件及网络资源简介 优点与缺点的讨论 现状与展望 精选 * 什么是电子克隆 Watson Crick 成功解析了DNA分子二级结构，开创了分子生物学时代 Karry Mullis 发明了PCR反应，体外大规模、有目的和快速地克隆目标基因成为可能 信息科学技术特别是数据库技术在战后飞速发展 精选 * 什么是电子克隆 表达序列标签（expressed sequence tags，EST）是对某个基因cDNA克隆测序所得的部分序列片段，长度大约为200~600bp 由于基因表达调控作用不同，同一个基因的mRNA剪接位点和方式不同，所以同一个基因的全长cDNA可能包含多个EST EST既代表了基因cDNA的某一区段，也表征了成熟mRNA可能的剪接方式 精选 * 什么是电子克隆 电子克隆技术是生物学数据库中EST数据库、核酸序列数据库、基因组数据库，采用同源性序列比对和归类分析、重叠区域组装和拼接等方法延长EST序列，直至没有与之同源的序列可供拼接为止，所得到的序列可以认为是相对应基因的全长cDNA，根据所得的cDNA序列设计囊括开放阅读框两端的引物，进行RT-PCR克隆出相应基因的方法 精选 * 什么是电子克隆 传统的克隆方法是利用基因特异性引物大量扩增