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六 细胞工程
细胞的结构与功能
一、 植物细胞工程
1. 细胞的全能性
(1)概念
生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性。
(2)细胞全能性的物质基础
生物体的每一个细胞都包含有该种所特有的全部遗传物质,既发育成为完整个体所必需的全部基因。
(3)全能性表达的条件
离体---必要条件
一定的营养物质---水 无机盐 维生素 氨基 酸等
激素---细胞分裂素 生长素
适宜的条件---无菌 温度 酸碱度
在生物的所有细胞中,受精卵的全能性最高,生殖细胞尤其是卵细胞有较高的全能性。
(4)全能性的差异性
植物细胞动物细胞(动物细胞中细胞核具有全能)
受精卵生殖细胞(配子、精子、卵子)体细胞
体细胞中—分化程度低分化程度高
幼嫩衰老
细胞分裂能力强细胞分裂能力
具体表现为
2. 植物组织培养
(1)原理----植物细胞的全能性
(2)过程----脱分化 再分化
离体的器官、组织和细胞
植物激素、无机盐和糖类等
愈伤组织
胚状体
有根、茎、叶的试管苗
特点:
a. 植物细胞的有丝分裂是植物组织培养基础。
b. 愈伤组织 细胞排列疏松而无规则,是一种高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。
c. 具有光合作用能力的类型是胚状体以后的结构和个体。
脱分化
再分化
再分化
d. 亲代与子代保持遗传的连续性与稳定性。
③脱分化与再分化的比较
比较内容
脱分化
再分化
过程
细胞→愈伤组织
愈伤组织→幼苗
形成体特点
细胞排列疏松而无规则,是一种高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞
先期有胚状体,后有根、芽、茎和叶
需要条件
离体
适宜的营养
生长素和细胞分裂素
离体
适宜的营养
生长素和细胞分裂素
光照
3.植物体细胞杂交
⑴概念 将两个来自不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞并把这杂种细胞培养成新的植物体的方法。
⑵过程
原生质体制备→原生质体融合诱导→杂种细胞的筛选和培养
↓
杂种植株的再生与鉴定
第二节 细胞工程简介二 动物细胞工程
动物细胞工程概述
动物细胞工程
动物细胞培养基本概念
培养液的成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等
原代培养:单个细胞 传至十代左右
传代培养:经原代培养的细胞 传40到50代。
细胞株:10到40、50代的细胞,遗传物质没发生改变。
细胞系:超过50代的细胞,遗传物质发生改变,可无限增殖。
动物细胞培养过程
胚胎成幼龄动物的组织器官(细胞来源)
单个细胞
原代细胞
细胞株
细胞系
剪碎胰蛋白酶
分离细胞
洗涤、稀释、分离
原代培养
传代培养
(遗传物质没有发生改变)
(遗传物质发生改变)
动物细胞融合
仙台病毒
融合过程示意图
单克隆抗体制备过程
植物细胞工程
二、植物组织培养
植物组织培养过程
二、植物组织培养
植物组织培养应用举例(一)
二、植物组织培养
植物组织培养应用举例(三)
融合体
杂种细胞
去壁的常用方法:
酶解法(纤维素酶、果胶酶等)
原生质体融合方法:
物理法:离心、振动、电刺激等
化学法:聚乙二醇(PEG)
三、植物体细胞杂交
过程:
三、植物体细胞杂交
过程示意图
三、植物体细胞杂交
植物体细胞杂交应用
核心要点突破
4.单克隆抗体的制备
(1)过程
基础知识梳理
3.过程
单克隆抗体的制备过程
核心要点突破
核心要点突破
植物组织培养和植物体细胞杂交
名称
植物组织培养
植物体细胞杂交
原理
细胞的全能性
细胞膜具有一定的流动性和细胞的全能性
过程
(5)动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较
植物体细胞杂交
动物细胞融合
原理
细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
细胞膜的流动性
细胞融
合方法
用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合
用胰岛蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散后诱导细胞融合
诱导手段
离心、电刺激、振动、聚乙二醇等诱导
与植物体细胞杂交相比,还可用灭活的病毒诱导
结果
获取杂种植株
获得杂交细胞,以生产细胞产品
用途
克服远缘杂交不亲和的障碍,扩展杂交亲本范围,培育新品种
制备单克隆抗体、病毒疫苗、干扰素等
(六)细胞分化
3.癌细胞
在个体正常发育过程中,细胞有控制地通过有丝分裂增殖,有秩序地发生分化,执行特定的功能。可是,有时部分细胞由于受到某种因素的作用则发生转化,不再进行终未分化,而变成了不受调节的恶性增殖细胞,这种细胞即称为癌细胞。
(1)癌细胞的主要特征
癌细胞的主要特征表现在无限增殖;接触抑制现象丧失;细胞间的粘着性降低,易分散和转移;易于被凝集素凝集;粘壁性下
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