植物组织培养技术任务五 蝴蝶兰.ppt

* 花托变绿子房膨胀 果荚生长 未成熟果荚掉落后破开 以授粉后120 d、未开裂的果荚为采收对象。注意采果荚时间很重要，因为采收时间早，胚发育不全，发芽率低，时间太迟，果荚易破裂，消毒灭菌处理困难。 * 取材前，先用酒精棉球把剪刀和未开裂的蒴果进行表面灭菌，再把蒴果从基部剪下，拿到无菌室的超净工作台上灭菌。果荚灭菌时，先用75%酒精浸泡30～60 S，无菌水冲洗2～3次，再用0.1%升汞溶液浸泡8～l5 min，无菌水冲洗5～6次，最后用无菌滤纸吸干材料表面多余的水分。用无菌解剖刀将蒴果纵向切开，将粉末状的种子以及种子上附着的少量纤维一同播种到无菌瓶中，瓶中含有20～30 ml左右的无菌水，轻轻晃动无菌瓶，使种子均匀分散，然后用无菌吸管吸取种子接种到培养基上。 * * 下节准备 熟练掌握蝴蝶兰花梗腋芽培养步骤； 带好实训报告与实训指导书； 进入种苗工程实训车间进行分组实战！ 园林科学与工程系 种苗工程实训车间欢迎你！ * 养兰是我们东方文化的一部分。 * 图片分别摄于澳力集团、科隆公司 * 图片分别摄于澳力集团、科隆公司 * 图片分别摄于澳力集团、科隆公司 * * “芝兰生于深谷，不以无人而不芳；君子修道立德，不为困穷而改节。”兰花，其超凡脱俗之美，自古以来就是文人雅士入诗入画、歌咏叹赏的对象。 　　在台湾，兰花产业是精致农业的代表，尤其盛产被誉为“兰中之后”的蝴蝶兰。正因台湾蝴蝶兰出口数量曾居全球第一，每年为台湾创造数亿美元的收入，因此也被称为是“火”树“银”花。 * 外植体的选择：诱导蝴蝶兰原球茎采用的外植体主要有根段、花梗苗根尖、花梗腋芽、茎尖、叶片、胚、花葶节间（花葶：地上无茎植物从地表，通常自基生莲座抽出的无叶花序梗）、花梗节或花梗节间切段、种子等。蝴蝶兰不同外植体的成活率有差异，其中花梗侧芽的成活率最高，其次为花梗，叶片和根尖最差。 * 嵌纹病毒、环斑病毒 * 将剪好的花梗在流水下冲洗30-60分钟； 放进75%的酒精中，约30 s后用无菌水冲洗2～3次； 再用0.1%的升汞液浸泡8 min，用无菌水冲洗3-5次，用无菌滤纸吸去多余的水分。 * * 初代培养外植体的褐变外植体褐变是指在接种后，其表面开始褐变，有时甚至会使整个培养基褐变的现象。它的出现是由于植物组织中的多酚氧化酶被激活，而使细胞的代谢发生变化所致。在褐变过程中，会产生醌类物质，它们多呈棕褐色，当扩散到培养基后，就会抑制其他酶的活性，从而影响所接种外植体的培养。抗酚类氧化常用的药剂有半胱氨酸、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）及抗坏血酸（Vc），可用50～200mg／L的浓度洗涤刚切割的外植体伤口表面，或过滤除菌后加入固体培养基的表层。 * 初代40天左右，反复接种原球茎、丛生芽，达到继代增值的目的。 * 初代培养外植体的褐变 * * 一般四十天一个周期，加入1g/l的活性炭 添加椰子汁、水解乳蛋白、香蕉汁等天然复合物有利于增殖。 将原球茎切割长数小块， 继代培养50～60d转接一次，增殖倍数为10～12，实现蝴蝶兰生产的工厂化育苗 * 初代40天左右，反复接种原球茎、丛生芽，达到继代增值的目的。 * 壮苗培养是提高移栽成活率的一项重要措施，生根效果也直接影响到生产效益。此阶段的关键在于严格筛选激素的种类和浓度，一般需降低培养基的激素含量，以便形成健壮苗。 * * 壮苗培育随着继代次数的增加，高浓度的6-BA虽然会提高增殖倍数，但也会引起幼苗的变异，在增殖10代以后或变异株开始出现后，只能用较低浓度的6-BA来促进丛生芽的生长，并及时淘汰变异株。丛生芽的增殖生长有一定的群体效应，当丛生芽切割成只有1～2个芽时，丛生芽的增殖大大减少，一个继代周期后大多数几乎没有增殖，只是苗长大一些。当丛生芽切割成有3～5个芽时，丛生芽的增殖则较为正常。切割丛生芽时，只能将丛生芽轻轻分开，不可对丛生芽的四周进行切割，否则会因切割伤口太多而导致培养基很快褐化，不利于丛生芽的生长与分化，甚至会造成丛生芽的死亡。对一些较大的丛生芽（芽高1.5厘米以上，单轴茎直径0.5厘米以上）进行横切可以大大提高增殖倍数。横切后会在丛生芽基部长出新一轮丛生芽，增殖倍数可提高5倍。因蝴蝶兰单轴茎较短小，在切割时对切割部位的掌握要准确，否则会将芽切死或因没有切去顶芽而达不到应有的增殖倍数。 * 1-2个月15-20株/瓶 * 初代40天左右，反复接种原球茎、丛生芽，达到继代增值的目的。 * 芽长至1.5厘米高、有2～3片叶时，转入生根培养基中 * 初代40天左右，反复接种原球茎、丛生芽，达到继代增值的目的。 * * * 根部勿积水，水分过多容易引起根系腐烂。一般7-10天代基质变干，盆面发白时再浇水 澆水前後都要秤重。 每一盆都要一樣重喔 ! 避免，以此調整澆水時間。 * 4个