化学系酶学演示文稿.ppt

酶经常以多(寡)聚体的形式存在 很多酶都有同工酶,可以聚合在一起,也可以单体存在 RNA可以是酶, 或酶活性主要成分 多亚基酶往往受正协同别构效应的调控 (i.e. hemoglobin),负协同效应,同促效应,异促效应 调节酶:共价调节,酶原激活,激动剂,….. 别 构 调 节 反 馈 抑 制 调 节 酶 天冬氨酸 转氨甲酰 酶 共 价 调 节 Purification of Enzymes 酶的活力单位: 1 IU 定义为每分钟催化1 umole 底物为产物的酶量 比活: (specific activity) 酶单位数/mg 蛋白质 酶的分离纯化过程中一定要随时追踪酶的活性 临床化验谷丙转氨酶: IU:1ml血清,pH 7.4,370C 30分钟产生2.5ug丙酮酸 按上述条件,0.1 ml血清得 10ug丙酮酸,求转氨酶活力 * 227 * * * * 催化机理 * 诱导契合 * 专一性 * 活性中心 * * * * * 226 * * * * * 多层次磷酸化调节 酶学Enzymology Enzyme, 酶, 酵素 希腊语原意: in yeast 生命体内催化化学反应的物质 细胞中大部分球蛋白为酶 酶作用特点 1.化学本质 2.催化效率高(106-1012) 3.酶促反应无副反应 4.专一性(结构,立体异构) 5.可调节(浓度,激素,同工酶,激动剂, 酶原) Effect of Temperature pH on enzymatic activity 酶 原 激 活 Classification of Enzyme 分子特点 (单体酶,寡聚酶,多酶体系) 化学组成 (单纯蛋白酶,结合蛋白酶) 催化类型 (国际酶学委员会I.E.C1961年制定,6类) 全酶 (holoenzyme) || 酶蛋白（apoenzyme或apoprotein) + 辅助因子 （cofactor) cofactor Constitution of Enzymes 辅基， prosthetic group 辅酶，coenzyme 金属离子 (也可归入辅基) (结合力强) table8-1 table8-2 EC号的第一个数字 1. oxidoreductase 氧化还原酶类 2. transferase 转移酶类 3. hydrolase 水解酶类 4. lyase 裂合酶类 5. isomerase 异构酶类 6. ligase/synthetase 连接酶类 International classification of enzymes 乳酸脱氢酶 lactate dehydrogenase, 1.1.1.27 己糖激酶(ATP:葡萄糖磷酸转移酶),E.C. 2.7.1.1 氧化还原酶 转移酶 水解酶 裂合酶 异构酶 连接酶 The nature of enzymatic reactions Michaelis-MentenEquation The initial velocity vs. substrate concentration 实验上只有初速度的测定才有意义 Changes of parameters during an enzymatic reaction S + E ES E + P S: substance P: product E: enzyme 发生在很短的时间内 What does Km mean? Km值越小, 底物与酶的亲和力越强, 反应越迅速(天然底物) Km物理意义,单位,特征性常数,运用,测定 An enzyme could have different Kms for different substrates Lineweaver-Burk plot(双倒数作图) Eadie-Hofstee plot Hanes plot kcat: the turnover number，number of product molecule generated in a second. kcat /Km: specificity constant of an enzyme with respect to a substr