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接种时注意: 接种过程应在酒精灯旁进行。 每瓶原种接栽培种10~15袋(两头接种)或50瓶左右。 接种用具使用前表面消毒,火焰灭菌。 接完种后,据接种量确定封口松紧度。 培养:同原种。 三级菌种生产的工艺流程 四、菌种污染原因及防止措施 (一)常见杂菌种类:细菌、酵母菌、放线菌和霉菌。 (二)污染原因及防止措施 培养基灭菌不彻底。表现为瓶壁和袋壁上出现杂菌菌落。原因:灭菌压力或时间不足,或者高压灭菌时锅内空气没有排尽。 措施:锅内空气排尽;保证灭菌压力和时间。 菌种带杂菌。表现为菌种块周围首先污染。 措施:选用纯正菌种。 接种操作中污染。污染点常分散在培养基表面。原因:接种时无菌操作不严格。 措施:接种场所及工具消毒、灭菌要彻底,接种操作在灯焰形成的无菌区进行,并要敏捷迅速。 培养室环境污染。培养室环境不卫生,或通风不良、潮湿等导致棉塞等封口材料受潮而污染。 措施:选择清洁、高燥的场地作菌种培养室。 破口污染。灭菌操作或运输中不小心,使容器破裂或出现微孔而污染。 措施:灭菌操作或运输中要轻拿轻放,所用器具不能带毛刺。 结 束 本章重点 菌种的本质,三级菌种的概念。 三级菌种的制作方法以及制作过程中应注意的问题。 常用的消毒、灭菌方法。 结 束 复习思考题 什么是菌种? 什么是三级菌种?为什么要制作三级菌种? 消毒和灭菌的概念?常用消毒、灭菌方法有哪些? 如何提高制种的成功率和菌种质量? 菌种制备过程中常见的污染原因及防止措施有哪些? 谢 谢! 放映结束 感谢各位的批评指导! 让我们共同进步 * 通常分三级。 又叫一级菌种或试管种,常用接种量:1只母种→4-6瓶原种。又叫二级菌种或瓶装种,每瓶原种→约20袋栽培种(两头接种时为10-15袋)→栽培袋(熟料栽培的接种量为3%-5%,生料栽培的接种量为5%-10%)。 又叫三级菌种或袋装种, 是指杀死一部分微生物。是指杀死全部微生物 * ①库房、培养室等可根据规模确定间数。②操作间用于装袋等,面积最好在20m2以上。③接种室和培养室外,最好设有缓冲间。 * 1.每天菌种生产量与冷却室、接种室、培养室的面积应当适应。经验比例:500:5:1:36 2.培养基制作、灭菌、冷却、接种应当一条龙流水作业。 3.冷却室和接种室在条件不允许情况下可经两室合用,冷却后用塑料膜在室内架起临时接种室进行接种。 4.资金使用的重点应放在灭菌、冷却、接种三处的设备和室内标准化设置上。 5.如菌种场等,应设在当地主要风向的上风头;带污染源的库室,如原料库等,应设在当地主要风向的下风头。 6.原料库、晾晒场应远离冷却室、接种室和培养室。 7.灭菌锅应是双门的,一门与有菌区(培养基制作室)相通,另一门与无菌区(冷却室)相通,双门不能同时开放。 8.冷却室、接种室要求作水磨石或油漆地面,四周墙壁和天花板油漆防潮,安装空气过滤装置。冷却室配备除湿和强制冷却装置,接种室配备分离式空调机。 9.培养室要有足够的空调装置,保证高温季节能正常生产。 10.工作人员必须具有一定微生物常识,经过严格无菌操作训练,进入无菌区前须沐浴更衣。 11.菌种灭菌后的运输工具必须灭菌或消毒后,方可进入无菌区使用。 * 600元左右/个,4000元左右/个, 6000-8000元左右/个. ①手提式高压灭菌锅:适于做母种培养基。 ②立式高压灭菌锅:适于做原种培养基。 ③卧式高压灭菌锅:适于原种或少量栽培种。 * 500元左右即可。一次可灭0.5-1吨料,多的可达1.5吨。 * 制种及熟料栽培时都需要接种设备。 有单人的、双人的,单人的8000元/台,有的达20000多元。只需100多元。做成一个比较密闭的箱子即可, 接种帐:即用塑料布搭一个棚子,四根棍支起来,把接头处用胶带粘好。 * ,否则只能在适温季节使用 2000—3000元一个,作为菌种场,最好配备恒温箱,如果温度不适,不仅菌种生长慢,而且长势弱,老化快。 其中灭菌设备和接种设备是必需的,其它据条件而定。适合于培养母种和少量原种。 * 以10ml:5g混合熏蒸1m3的比例。产生白色烟雾,刺激性较大,但效果好。硫磺:空间消毒,点燃前提高空气湿度效果好。 如克霉灵、菇保一号等, 过氧乙酸 * 培养基是进行食用菌栽培及研究的基础。 * 马铃薯葡萄糖琼脂培养基( * 在试管中高4-5cm,摆出的斜面应为试管长度的2/3-3/4 。分装时,培养基不能粘在试管口上, 时间太长压力太大时,营养物质会分解而造成营养损失。 当排出的汽烫手时关闭放气阀, * * ,选取组织的方法与平菇不同 * ,这个过程叫做转管或母种的扩大 * 接种用具要表面消毒,火焰灭菌,冷凉再用。 母种块约3mm见方,带1~2mm厚的培养基。 接种动作要尽量快。 由于组织分
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