人乳头瘤病毒11型E7蛋白基因的构建表达及检测尖锐.docVIP

PAGE HPV6bL1-TpN15 嵌合蛋白检测尖锐湿疣、梅毒患者宫颈分泌物抗体的意义 郑丹1，楼迪栋2，刘菁3，屈植风4，周翠萍5 贵阳市妇幼保健院保健部（郑丹，刘菁，屈植风，周翠萍）；贵阳医学院法医学教研室（楼迪栋） 贵州 贵阳 550003 【摘要】 目的 研究人乳头瘤病毒(HPV)6b型L1和梅毒螺旋体(Tp)TpN15 嵌合基因在原核细胞的表达及其检测尖锐湿疣(CA)和TP患者宫颈分泌物中的抗体意义。 方法 将重组质粒pET32a(+)/HPV6b L1- TpN15经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后表达，用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS ）和蛋白质印迹法（WB）分析鉴定；经镍螯合亲和层析胶体(Ni-NTA Agarose)分离纯化HPV6b L1- TpN15融合蛋白作抗原，用间接ELISA法对54例CA患者、43例TP患者、42例CA-TP混合感染者和65名健康对照者宫颈分泌物标本进行slgA抗体检测。 结果 HPV6b L1- TpN15融合蛋白在原核表达系统中得到了较高表达(浓度为41μg／m1)，CA组、TP组、CA-TP混合感染组和健康对照组宫颈分泌物slgA抗体均值分别为0．06±0．02、0．07±0．001、0．13±0．003和0．04±0．005，阳性率分别为22.2％（12/54）、20.9％（9/43）