实验四 溶血素单位滴定.docVIP

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溶血素单位滴定 原理: 略述补体经典激活途径 SRBC+许 SRBC +许 + + + 不溶血 溶血 免疫血 清 材料 2%绵羊红细胞 补体豚鼠血清,1:30稀释 溶血素免疫小鼠血清 其他略 方法: 1.制备溶血素: 1)摘眼球处死小鼠,使小鼠血流入一EP管中。 2)室温凝固15-30分钟 3)5000rpm离心10分钟 4)将上清移入一只新EP管 2.溶血素稀释(在EP管中进行) 1 2 3 4 5 NS 0.9 0.5 0.5 0.5 0.5 小鼠血清 0.1 0.5 0.5 0.5 0.5 dilution 1:10 1:20 1:40 1:80 1:160 3.溶血素滴定加样(ml) 试管号 不同稀释度溶血素( 补体 生理盐水(NS) 2%SRBC 结果 1 0.2(1:10) 0.2 0.4 0.2 2 0.2(1:20) 0.2 0.4 0.2 3 0.2(1:40) 0.2 0.4 0.2 4 0.2(1:80) 0.2 0.4 0.2 5 0.2(1:160) 0.2 0.4 0.2 6(补体对照) — 0.2 0.6 0.2 7(完全溶血对照) 双蒸水0.8 0.2 完全溶血 4.充分混匀,37℃30分钟。 结果:发生完全溶血的最高稀释度溶血素活性为1个单位。

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