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溶血素单位滴定
原理:
略述补体经典激活途径
SRBC+许
SRBC
+许
+
+
+
不溶血
溶血
免疫血 清
材料
2%绵羊红细胞
补体豚鼠血清,1:30稀释
溶血素免疫小鼠血清
其他略
方法:
1.制备溶血素:
1)摘眼球处死小鼠,使小鼠血流入一EP管中。
2)室温凝固15-30分钟
3)5000rpm离心10分钟
4)将上清移入一只新EP管
2.溶血素稀释(在EP管中进行)
1
2
3
4
5
NS
0.9
0.5
0.5
0.5
0.5
小鼠血清
0.1
0.5
0.5
0.5
0.5
dilution
1:10
1:20
1:40
1:80
1:160
3.溶血素滴定加样(ml)
试管号
不同稀释度溶血素(
补体
生理盐水(NS)
2%SRBC
结果
1
0.2(1:10)
0.2
0.4
0.2
2
0.2(1:20)
0.2
0.4
0.2
3
0.2(1:40)
0.2
0.4
0.2
4
0.2(1:80)
0.2
0.4
0.2
5
0.2(1:160)
0.2
0.4
0.2
6(补体对照)
—
0.2
0.6
0.2
7(完全溶血对照)
双蒸水0.8
0.2
完全溶血
4.充分混匀,37℃30分钟。
结果:发生完全溶血的最高稀释度溶血素活性为1个单位。
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