一土壤脲酶活性测定一.ppt

环境化学实验讲义 南开大学环境科学与工程学院 实验一 土壤脲酶活性测定 一、实验目的 掌握土壤脲酶活性测定第一种方法，了解所取土壤的脲酶活性。 了解尿素这一有机物在土壤环境中的降解转化。 二、简单原理 酶是一类具有蛋白质性质的、高分子的生物催化剂。土壤酶是活的有机体所合成的，或者在其生长过程中分泌与体外，或者在其死亡后自溶而释放出。所有的酶均能显示其活性。 显著的酶的特征之一是其催化反应的专一性。例如，脲酶对尿素的催化降解就及其专一。 土壤中的酶的来源有二种。一是来自于高等植物根系分泌及土壤中动植物残体分解。二是来源于土壤微生物的生命活动。 土壤酶可分为胞内酶和胞外酶两种。胞外酶或溶出后的胞内酶进入土壤结构后，均具有相对稳定性，如能抗微生物分解和抗热稳定性等。它们以三种形式存在于土壤中，一是以吸附状态贮积于土壤中。二是于土壤腐殖质复合存在。三是以游离状态存在。 对于脲酶，它能促使尿素水解转化成氨、二氧化碳，反应如下 : 在土壤中，在pH值为6.5~7.0是脲酶活性最大，通过测定释放出的NH3量，可以确定脲酶的活性。土壤中脲酶活性一般以37℃培养48小时每克土壤释放出的NH3–N毫克数表示。 三、步骤概要 1、取二个250ml锥形瓶，各加入10.0克土壤，再各加入10ml混合磷酸盐缓冲溶液（pH6.8）。摇动处理15分钟，使均匀。在往第一瓶内加入10ml浓度10