临床常见标本的微生物检验.PPT

（一）送检指征1. 男性泌尿系统表现 尿急、尿频、尿痛 尿道分泌物增多 会阴部疼痛及阴囊疼痛 性功能障碍 泌尿生殖器畸形和缺损 2. 女性泌尿系统表现 分泌物增多及性状异常 尿道口搔痒及脓性分泌物流畅 下腹疼痛 月经失调 阴道出血 外阴搔痒 外阴或阴道疼痛 性功能障碍 （二）标本采集 生殖器官标本包括子宫颈、阴道、前列腺；男性及女性外生殖器的分泌物及经血等。应根据感染的部位和可能的病原体决定用于病原学诊断的标本种类、采集部位和采集方法等。阴道、子宫颈及前列腺等分泌物应由医师采集，收集于无菌试管内送检。 尿道分泌物 1.女性尿道：患者排尿1小时后采集，首先拭去尿道口的渗出物；再用拭子通过阴道，靠着耻骨联合，按摩尿道，采集分泌物；如未获得分泌物，清洗外尿道，用灭菌纱布或棉球擦拭，用泌尿生殖道拭子插入尿道2－4cm，旋转拭子2秒。 2. 男性尿道：用泌尿生殖道拭子插入尿道腔2－4cm，旋转拭子，至少停留20秒，而使之容易吸收。 阴道分泌物 擦除过多的分泌物和排出液，用无菌棉拭子采取阴道口内4厘米内侧壁或后穹窿处分泌物，如果需要涂片，需再用一个拭子。 男性前列腺： 用前列腺按摩法采集前列腺液。清洗尿道口，冲洗尿道膀胱，从肛门用手指按摩前列腺，使前列腺液溢出，用无菌容器收集。无肉眼可见脓液时，可用灭菌拭子轻轻伸入前尿道内，旋转拭子采集标本。 （三）注意事项 1.生殖器是开放性器官，标本采集过程中应严格遵 循无菌操作规程以减少杂菌污染。 2.由于阴道正常菌群的存在而使细菌的分离鉴定 受到干扰，所以在采集女性生殖道标本时应注意尽 量减少或避免正常菌群的污染。 3.疑有宫腔感染，如遇产妇需行剖宫产，待胎儿 娩出后取宫腔分泌物，并同时取婴儿耳拭子一同送 检。 4.沙眼衣原体和病毒均在宿主细胞内繁殖，取材 时拭子应在病变部位（移行上皮处稍内）停留十几 秒钟，并采集尽可能多的上皮细胞。 5. 生殖道感染厌氧菌也较多见，疑有厌氧菌感染时，标本采集和运送应避免与氧气接触，最佳方法是床边采样，直接接种至厌氧装置内。 6. 淋病奈瑟菌检查时，取材的深度一定要够，因为淋球菌好发于柱状上皮细胞而不是复层鳞状上皮细胞。不论男女尿道及子宫颈均需用拭子插入尿道及子宫颈3cm深转动并停留10-30s取样送检。 7. 淋病奈瑟菌抵抗力低，对外环境变化颇为敏感，对寒冷和干燥抵抗力很弱。因此，为了保证培养有足够的成功率，取材后要尽快送检，立即接种，标本离体时间越短越好。 直接接种于巧克力培养基，置于5%CO2温箱内，18-24小时后观察。 六、 化脓和创伤标本 三.痰标本的均质化处理： 目的：有助于痰核内部细菌的暴露，以提高痰培养标本的阳性培养率。 方法：向痰液内加等量的用无菌的PH7.6的磷酸盐缓冲液配制的1%的胰蛋白酶溶液，放置37 ℃温箱内消化90min即能使痰液均质化，而对细菌培养无影响。此外，还可用玻璃组织研磨器或振荡器。 痰标本的处理（常规） 取痰液分区3区划线接种于血平板(及麦康凯平板MAC)上，若需培养嗜血杆菌，再接种于加入抗生素(每毫升巧克力琼脂内加万古霉素50mg，杆菌肽30mg，氯林可霉素1mg）的嗜血杆菌选择性巧克力平板（HA）。 血平板置于35℃普通温箱，巧克力平板置于5%CO2温箱内。 18-24小时后观察。 痰培养的结果判断 在培养出细菌时都面临判断该细菌是致病菌或携带菌的问题，而这些标本的采集很难不污染携带菌。 现代感染的特点是，低免疫人群大大增多，条件致病菌、非致病菌引起的感染增多，这些特点给致病菌的判断带来了困难。 痰标本在平板上的菌落量化指标 未列入规范要求（参考） 有意义的痰培养结果 合格痰标本培养优势菌中度以上生长(》+++) 合格痰标本少量生长，但与涂片镜检结果一致(肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌) 多次培养到相同细菌； 无意义的痰培养结果 痰培养有上呼吸道正常菌群的细菌(如草绿色链球菌、表皮葡萄球菌、非致病奈瑟菌、类白喉杆菌等) 痰培养为多种病原菌少量(+++)生长。 三、 尿培养标本 尿路感染是指尿道内有大量微生物繁殖而引起的尿路炎症。尿路感染并非是一种单一的疾病，而是一种临床综合征。根据感染部位可分为上尿路感染（如肾盂肾炎）及下尿路感染（如膀胱炎），男性还可出现前列腺感染，不同部位同时感染也很常见。尿路感染是人类最常见的感染之一，可发生于各个年龄段的人群，好发于女性，男:女之比为1:10。 典型的临床表现为发热、尿频、尿急、尿痛、排尿困难和耻骨上压痛，临床表现可因患者年龄和健康状况不同而异。新生儿尿路感染的症状往往是非特异性的、模湖的，可表现有厌食，呕吐，倦怠，无发热的菌血症等；