第七章 酶非水相化.pptVIP

第七章 酶非水相催化;观念的改变;对于大多数有机化合物来说，水并不是一种适宜的溶剂。 由于水的存在，往往有利于如水解、消旋化、聚合和分解等副反应的发生。 1984年，克利巴诺夫（Klibanov）等人在有机介质中进行了酶催化反应的研究，并成功地在有机介质中利用酶的催化作用，获得酯类、肽类、手性醇等多种有机化合物，指出酶可以在水与有机溶剂的互溶体系中进行催化反应。——非水酶学;第一节 酶非水相催化的主要内容;有机介质中的酶催化;气相介质中的酶催化;超临界流体介质中的酶催化;优点： 1)与水相比较，脂溶性反应物和产物可溶于超临界CO２中，而酶作为蛋白质不溶解，有利于三者的分离； 2)产品回收时，不需要处理大量的稀水溶液，可解决环境污染问题； 3)与有机溶剂体系相比，CO２无毒，不燃烧、廉价、无有机溶剂残留之虞； 4)CO２超临界体系具有气体的高扩散系数、低粘度和低表面张力使底物向酶的传质速度加快从而使反应速度提高，且在临界点附近，溶解能力和介电常数对温度和压力敏感，故反应速度提高。亦可以控制反应速率和反应平衡； 5)可简化产物的分离，有可能将反应和分离过程耦合。 已对10多种酶反应进行了研究，主要是酯化反应、酯交换反应、酯水解反应和氧化反应。反应条件温和，反应温度低于50℃;离子液介质中的酶催化;第二节有机介质中水和有机溶剂对酶催化反应的影响;1、微水介质体系； 2、与水溶性有机溶剂组成的均一体系； 3、与水不溶性有机溶剂组成的两相或多相体系； 4、（正）胶束体系； 5、反胶束体系。;1、微水介质体系;2、与水溶性有机溶剂组成的均一体系;3、与水不溶性有机溶剂组成的两相或多相体系;4、（正）胶束体系;5、反相胶束体系;二、水对有机介质中酶催化的影响;水的影响;1、水对酶分子空间构象的影响;2.水对酶催化反应速度的影响 ;;有机介质中含两类水：结合水、游离水； 在结合水不变的条件下，体系含水量的变化对酶催化活性影响不大； 然而在一些体系中，溶剂和底物性质对酶活力也有直接或间接影响； 为了排除溶剂对最适含水量的影响，Halling建议用水活度（aw）描述有机介质中酶催化活力与水的关系： 水活度：体系中水的逸度与纯水逸度之比； 用体系中水蒸汽压与相同条件下纯水蒸汽压之比表示； Aw=P/Po P：一定条件下体系中水的蒸汽压 Po:相同条件下纯水的蒸汽压 水活度与溶剂极性大小无关，最适含水量与溶剂极性成正比，故采用水活度作参数更确切；;;1. 有机溶剂对酶结构与功能的影响;（1）有机溶剂对酶分子表面结构的影响：由于酶分子与溶剂的直接接触，酶分子表面结构发生变化； （2）有机溶剂对酶活性中心结合位点的影响：通过减少整个活性中心的数量，溶剂对酶的活性中心产生影响，活性中心数目丧失的多少取决于溶剂中的疏水性大小。 Why？溶剂与底物竞争酶的活性中心结合位点，溶剂为非极性，影响更明显，溶剂分子能渗透入酶的活性中心，降低活性中心的极性，增加酶与底物的静电斥力。;（1）有机溶剂对结合水的影响;（2）溶剂属性(极性)与酶活力的定量关系;３、有机溶剂对底物和产物分配的影响;第三节 酶在有机介质中的催化特性;一、底物专一性;底物专一性(续);二、对映体选择性（enantioselectivity);有机溶剂中酶对底物的对映体选择性由于介质的亲(疏)水性的变化而发生改变。 酶在水溶液中立体选择性强，疏水性强的有机溶剂中的酶的立体选择性差。 这种选择性是由底物的两种对映体把水分子从酶分子疏水结合位置换出来的能力不同； 介质的疏水性加大，L型底物置换水的过程在热力学上不利。;溶剂的几何形状也影响酶的对映体选择性，如Ottolina报道一些脂肪酶、蛋白酶在（R）-香芹酮及（S）-香芹酮中立体选择性不同； 对映体选择性意义： 蛋白酶在水溶液中对L-氨基酸起作用，而在有机介质中可用D-氨基酸为底物合成手性药物，有重要应用。;三、区域选择性（regioselectivity） ;四、键选择性（chemoselectivity);五、 热力学稳定性;六.pH值特性;在有机介质中酶所处的pH环境与酶在冻干或吸附到载体上之前所使用的缓冲液pH值相同，称为pH-imprinting; 当酶分子从水溶液转移到有机介质时，原有的解离状态不变，被保持在有机介质中； 有机介质中酶催化反应的最适ph通常与在水溶液的pH接近； 但有些有机溶剂中酶的最PH与水溶液中相差较大，还与缓冲液种类和离子强度有关; 可用有机相缓冲液(疏水性酸与对应盐或疏水性碱与对应盐）控制酶的解离状态，消除酶pH印记特性的影响；;第四节 有机介质中酶催化反应的条件及其控制;一、有机介质中酶催化反应的类型;1、??成反应