食品仪器分析技术项目五气相色谱法.ppt

（二）固相萃取 固相萃取（SPE）是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附，达到分离和富集目标化合物的目的。与溶剂萃取相比，固相萃取具有溶剂用量少、花费时间短、操作简便等优点，不足之处是目标化合物回收率较低，精密度较差。 1.固相萃取柱活化 萃取柱在使用前必须用适当的溶剂活化萃取柱，目的是除去吸附剂中可能存在的杂质，同时湿润吸附剂，提髙回收率和重现性。 2.上样 将液态或溶解后的固态样品倒入活化后的萃取柱，然后利用抽真空、加压或离心等方法使样品进入吸附剂。 3.洗涤和洗脱 在样品进入吸附剂、目标化合物被吸附后，可先用较弱的溶剂将保留值弱的干扰物质洗脱掉，再用较强的溶剂将目标化合物洗脱下来，加以收集。若选择的吸附剂对目标化合物吸附很弱或不吸附，而对干扰物质有较强吸附时，也可让目标化合物先淋洗下来加以收集，而使干扰物质保留在吸附剂上，达到分离目的。 4.洗脱液浓缩 收集目标化合物洗脱液，用真空浓缩方法除去溶剂，再用氮气吹至近干。 5 .溶解、过滤、分析 用适当溶剂（色谱纯）溶解并定容至一定体积（一般2mL)，经0.22μm有机滤膜过滤后，上GC进样分析。 The End 项目五 气相色谱法及其在食品分析中的应用 【知识基础】 一、气相色谱法由来和分类 (一)色谱法的由来 1906年，俄国植物学家茨维特（M.S.Tswett)首先提出了色谱的概念。他在研究植物叶色素的过程中，采用了下图的装置 （二）色谱法的分类 1.按固定相和流动相的状态分类 气相色谱法（GC）、液相色谱法（LC）； 可固定的仅有固相，液相也可以通过一定方法固定下来，因此又可细分为气固色谱(GSC)、气液色谱(GLC)、液固色谱(LSC)和液液色谱(LLC)四种色谱方法。 2.按固定相性质和操作方式分类 将固定相装在柱管内的色谱法称为柱色谱，包括填充柱色谱和毛细管柱色谱； 固定相涂在玻璃板或其它平板上的色谱法称为平板色谱法； 固定相为滤纸及其吸着水的色谱方法称为纸色谱。 3.按色谱分离过程的物理化学原理分类 吸附色谱法；分配色谱法。 二、色谱分离原理 试样由流动相气体（俗称载气）携带进入色谱柱，每种组分都倾向于在流动相和固定相之间形成吸附或分配平衡。由于组分性质的差异，固定相对不同组分的吸附或溶解能力有所不同，从而形成差速迁移。易被吸附或溶解的组分，在柱内移动的速度慢，停留的时间长；反之，不易被吸附或溶解的组分在柱内移动速度快，停留时间短。所以，经过一定的时间间隔（或一定柱长）后，性质不同的组分便彼此达到了分离。 三、色谱图及色谱有关名词术语 一般以检测器对各组分的电信号响应值（mV）为纵坐标，以组分流出色谱柱的时间（t）或载气流出体积（V）为横坐标。色谱图上每个色谱峰至少代表样品中的一个组分。 基线：在实验操作条件下，仅有载气通过检测器时系统所产生的响应信号曲线。稳定的基线应是一条直线 峰 高：峰顶到基线的垂直距离AB称峰高，以h表示。 峰面积：每个组分的流出曲线与峰底基线所围区域的面积称为峰面积，以A表示。 保留值 死时间tM 保留时间tR 调整保留时间tR’ 死体积VM 保留体积VR 调整保留体积VR’ 相对保留值γis 选择因子α 区域宽度 1.半峰宽W1/2： 2.峰底宽W： 3.标准偏差σ： 分配系数K　在平衡状态下，组分在固定相与流动相中的浓度比。 分配比 k 指在一定温度、压力下，组分在两相间达到分配平衡时，组分在固定相和流动相中的分配量（质量、体积、物质的量）之比。 四、气相色谱理论 （一）塔板理论 塔板理论将色谱柱假想为一个精馏塔，即色谱柱由许多连续、等高的水平塔板组成，在每一块塔板上，组分在固定相与流动相两相间瞬间达到分配平衡，然后随流动相向前移动，遇到新的固定相再次达到分配平衡，如此反复，直到柱的出口。 （二）速率理论 速率理论吸收了塔板理论中板高的概念，并充分考虑了组分在两相扩散和传质过程，从动力学的角度较好地解释了影响板高的各种因素，导出了塔板高度H与载气线速度u的关系: 五、色谱柱的总分离效能指标 (一)分离度 分离度又称分辨率,相邻两组分色谱峰的保留时间之差与两峰底宽度之和一半的比值，即： R